Scientific journal
Advances in current natural sciences
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,775

BIOINFUZIN’S APPLICATION IN VETERINARY SCIENCE

Andreeva S.D. 1 Ivanovsky A.A. 1, 2
1 Vyatka SAA
2 Zone scientific research institute of agriculture of the Northeast of N.V.Rudnitsky
2489 KB
As a result of the conducted researches Bioinfuzin with the set target properties and ecologically safe process of its receiving was succeeded to develop technology of receiving a preparation. Sharing of Bioinfuzin with means of symptomatic therapy (antibiotics, vitamins, etc.) allowed to increase therapeutic efficiency of actions at diseases of a digestive tract and respiratory pathologies of calfs for 15-20 %.
Bioinfusin
Rhaponticum carthamoides
calves
disease

В настоящее время внимание ученых привлекают естественные источники биологически активных веществ, такие как, левзея сафлоровидная (Rhaponticum carthamoides), серпуха венценосная (Serratula coronata), почки тополя черного (Populus nigra), прополис (Propolis) и т.д. [1].

Экстракты левзеи сафлоровидной используются в нетрадиционной и официальной медицине в качестве тонизирующего средства при функциональных расстройствах нервной системы (включая стрессы), при мышечном утомлении и ослаблении функций разных органов, для терапии и профилактики болезней сердечно-сосудистой системы, онкологических и эндокринных патологий. Их применение рекомендовано для адаптации человека к экстремальным ситуациям, в частности, как средств повышающих силовые качества спортсменов. Левзея сафлоровидная является одним из важнейших источников экдистероидов – биохимических соединений, выполняющих функцию гормоноподобной регуляции физиологических процессов в организме. Являясь по своему химическому строению довольно однородной группой, экдистероиды присутствуют у многих видов животных и растений [1].

Анализ содержания экдистероидов в структуре надземной части левзеи сафлоровидной показал, что наибольшее количество экдистероидов содержится в цветочных корзинках генеративных побегов (0,40 %) и молодых листьях вегетативных побегов (0,43 %). Максимальный выход экдистероидов – до 2,5 кг из 1 тонны сухого растительного сырья можно ожидать при заготовке растений примерно на 30-й день вегетации. Примерами лекарственных препаратов, содержащих экдистероиды, можно назвать настойку левзеи и Экдистен, которые применяются в медицине в качестве адаптогенных средств [2, 3].

Цель и задачи исследований. Цель настоящей работы состояла в разработке инъекционной формы препарата из левзеи, обладающей иммуностимулирующим действием для животных. Для достижения этой цели необходимо было разработать технологию производства препарата, установить его безвредность и иммуностимулирующую активность в опытах на животных.

Материалы и методы исследования

В качестве сырья для наработки Биоинфузина использовали высушенные листья растения левзеи сафлоровидной. Сушка осуществлялась в течение 3-х суток при Т=+30-40°С, в темном, хорошо вентилируемом сушильном шкафу.

Экстракцию проводили 70 % этанолом в течение 10 суток. Супернатант отделяли от исходного материала двухэтапной фильтрацией, с использованием фильтра «владипор». В дальнейшем приготовляли две различные комбинации препаратов: первая представляла из себя этанольный экстракт левзеи в физиологическом растворе, а вторая – дополнительно содержала глюкозу. Фасовка готового препарата проводилась в стерильном боксе, с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Контроль препарата проводили следующим образом. Из общей массы каждой серии Биоинфузина отбирали 10 флаконов по 200 мл. Пять флаконов использовали для анализа, а пять оставляли и хранили 13 месяцев в холодильнике. Один раз в месяц определяли внешний вид препарата, цвет, наличие механических примесей, плесени, стерильность и безвредность на 5 белых мышах, которым вводили внутрибрюшинно 0,5 мл Биоинфузина. Биостимулирующую активность препарата оценивали по изменению массы белых мышей после однократной внутримышечной инъекции в дозе 0,2 мл/мышь.

Лечебно-профилактическая эффективность определялась в научно-производственном опыте на телятах. Идентификацию Биоинфузина осуществляли методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Силуфол» 254UV в системе растворителей этанол – вода дистиллированная 4:1. Для этого из наработанной и расфасованной в стеклянные флаконы одной серии препарата микрошприцем брали пробу и наносили на пластины с периодичностью 1 раз в месяц в течение 13 месяцев, просматривали характер флюоресценции в УФ-лучах, сравнивая со стандартным раствором 20-гидроксиэкдизона. Сухой остаток определяли путем упаривания в стеклянном, предварительно взвешенном бюксе при Т=105° С до постоянной массы. Аминокислотный состав Биоинфузина определяли с помощью анализатора ААА-Т-339.

Результаты исследования и их обсуждение

В результате наблюдений на протяжении всего периода эксперимента случаев контаминации микрофлорой какой-либо серии препарата не отмечено, также как и гибели мышей которым его вводили. На протяжении всего периода исследований характер флюоресценции (зеленовато-голубое свечение в УФ-лучах) и величина Rf =0,8 не изменялась. Сухой остаток в препарате находился в пределах 50-65 мг/мл.

Содержание экдистероидов соответствовало 0,0257 %.

Исследования аминокислотного состава опытных образцов препарата, полученного в различных режимах экстракции, показали, что концентрация аминокислот выше в случае экстрагирования сырья 70 % этанолом. Данные приведены в таблице.

Аминокислотный состав опытных образцов биоинфузина в различных режимах экстракции

Аминокислоты

t = 20-25° С (H2O)

70 % этанол

мг/г

СВ

в %

от СП

в %

от Nобщ

мг/г

СВ

в %

от СП

в %

от Nобщ

Аспарагиновая

0,002

8.7

5.7

0,0031

10.5

6.9

Треонин

0,001

3.6

2.7

0,0015

5.2

3.9

Серин

0,0009

3.1

2.6

0,0013

4.4

3.7

Глутаминовая

0,003

10.0

5.9

0,004

13.8

8.2

Пролин

0,002

7.1

5.5

0,002

6.6

5.0

Глицин

0,0012

3.9

4.6

0,0017

5.8

6.8

Аланин

0,0013

4.3

4.2

0,0019

6.3

6.1

Цистин

0

0

0

0,0002

0.7

0.5

Валин

0,001

4.2

3.1

0,0019

6.3

4.7

Изолейцин

0,0008

2.8

1.9

0,0013

4.2

2.8

Лейцин

0,002

6.9

4.9

0,0032

10.9

7.3

Тирозин

0,001

3.4

1.6

0,0012

4.1

2.0

Фенилаланин

0,001

3.3

1.8

0,0015

5.0

2.7

Гистидин

0,004

1.4

2.4

0,004

1.2

2.1

Лизин

0,0018

6.0

7.2

0,0019

6.4

7.7

Аргинин

0,0012

4.2

8.3

0,0016

5.5

11.0

Сумма

0,0242

73

62

0,0289

97

81

Примечание. СВ – сухое вещество; СП – сырой протеин, Nобщ – общий азот.

В дальнейшем приготовляли две различные комбинации препаратов: первая представляла из себя этанольный экстракт левзеи в физиологическом растворе, а вторая – дополнительно содержала глюкозу.

Предварительные испытания двух опытных серий препаратов на белых мышах (5 мышей в группе), которым препарат инъецировали однократно внутримышечно в дозе 0,2 мл/мышь, показали, что вариант с глюкозой увеличивал массу тела белых мышей к 10 дню наблюдений в 1,12 раза больше, чем в случае применения его без глюкозы. В результате остановились на варианте препарата с добавлением глюкозы, которая, как известно, является энергетическим источником и обладает антитоксическим действием (рисунок).

andree1.tiff

Динамика изменения массы тела белых мышей (г) после применения различных вариантов Биоинфузина

Научно-производственные опыты с препаратом Биоинфузин, проведенные в хозяйствах Кировской области на 350 телятах показали, что препарат наиболее эффективен при внутривенных инъекциях. В сравнении с интактными животными, внутривенная инъекция в дозе 0,75 мг/кг массы тела позволяла снизить заболеваемость телят диареей на 22 %, а респираторными болезнями – на 25 %.

Совместное использование Биоинфузина со средствами симптоматической терапии (антибиотики, витамины и т.д.) позволяло повысить терапевтическую эффективность мероприятий на 15-20 %.

Заключение. В результате проведенных исследований удалось разработать технологию получения препарата Биоинфузин с заданными целевыми свойствами и экологически безопасным процессом его получения, не требующую специального дорогостоящего оборудования. В качестве основного действующего вещества Биоинфузина идентифицирован 20-гидроксиэкдизон.