Цель исследования. Оценить степень клеточной пролиферации дермальных фибробластов людей различных возрастных групп при их культивировании in vitro.
Материал и методы. Материалом исследования являлись биоптаты кожи здоровых женщин в возрасте от 30 до 60 лет (пациентки клиники пластической хирургии, 12 человек) и кожно-мышечные лоскуты 3 человеческих эмбрионов (срок 8-12 недель).
Фибробласты дермы получали путём фрагментации и трипсинизации кусочков кожи. Клетки культивировали в пластиковых флаконах с питательной средой Игла, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, L-глутамин, гентамицин при температуре 37°С и 5% СО2 в течение 7-14 сут. Проводили фиксацию материала метанолом, окрашивали азур-эозином. Клеточную культуру просматривали в световом микроскопе. Оценивали скорость пролиферации дермальных фибробластов.
Результаты исследования и их обсуждение. Фибробласты эмбриональной ткани вследствие активного роста клеток уже на 3-5 сут. во всех случаях формировали клеточный монослой. Дермальные фибробласты женщин возраста 30-35 лет отличались медленным ростом (на 6-10 сут), но клеточного монослоя не образовывали. При культивировании фибробластов дермы женщин в возрасте 40-60 лет клеточный рост был либо пролонгированным (на 8-10 сут.) с дальнейшей гибелью клеток, либо отсутствовал. Полученные данные указывают на высокий пролиферативный потенциал эмбриональных фибробластов, тогда как у фибробластов дермы взрослых людей был обнаружен низкий потенциал их пролиферации. Ранее было установлено, что продолжительность жизни культур клеток уменьшается с увеличением возраста их донора. Ограничение пролиферативной способности дермальных фибробластов при старении свидетельствует о нарушении их функциональных свойств: угнетении продукции углеводно-белковых комплексов основного вещества и волокон дермы, снижении синтеза многочисленных факторов роста клеток, а также преждевременной деградации компонентов внеклеточного матрикса. Всё это неизбежно приводит к нарушению регенерации дермы и формированию признаков старения кожи.