Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,775

Клонирование М-сегмента вируса ГЛПС в вектор рGEM-T EASY

Мухаметханов Н. Х. Кулагин В. В. Алсынбаев М. М. Ткаченко Е. А.
Вирус ГЛПС серотип Пуумала (PUUV) относится к роду Хантаан (Hantaan) семейства Буньявириде (Bunyaviridae),является основным серотипом, циркулирующий на территории республики Башкортостан и вызывает геморрагическую лихорадку с почечным синдромом. ГЛПС занимает ведущее место среди природно-очаговых инфекций в Башкирии и встречается почти во всех городах и районах республики, составляя более 40% заболеваемости на всей территории Российской Федерации.Актуальность проблемы обусловлена отсутствием тенденции к снижению заболеваемости и отсутствием вакцины. Разработанная южно-корейскими исследователями вакцина на основе пассирования вируса в мозге мышей-сосунков сопряжена с трудоемкостью технологического процесса и опасностью заражения персонала. В связи с чем, перспективным направлением является разработка генно-инженерной вакцины на основе М-сегмента вируса ГЛПС, который кодирует поверхностные гликопротеины G1 и G2. Была выделена вирусная РНК из культуры зараженных клеток Vero E6 гуанидинфенолхлороформным методом , осажденна 2V этанола и растворена в DEPC-обработанной воде с добавлением ингибитора РНКазы. Синтезирована кДНК с использованием прямого праймера 5´-gga gga ccg cca tgg gag aac tta gtc cag-3´. Проведена амплификация сегмента с дополнительным обратным праймером 5´-tta ggg ctt atg ttc ttt cct gta act agg tct-3´. Полученный ПЦРпродукт клонирован в вектор рGEM-T Easy. Штамм E.coli JM109 был трансформирован и высеян на селективную среду содержащую ампициллин +IPTG+Xgal. Колонии с рекомбинантной плазмидой отобраны для дальнейшей работы.

Библиографическая ссылка

Мухаметханов Н. Х., Кулагин В. В., Алсынбаев М. М., Ткаченко Е. А. Клонирование М-сегмента вируса ГЛПС в вектор рGEM-T EASY // Успехи современного естествознания. – 2003. – № 11. – С. 72-72;
URL: https://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=15271 (дата обращения: 29.03.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674