Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,746

ИНДУЦИБЕЛЬНЫЙ ТИП РЕЗИСТЕНТНОСТИ К КЛИНДАМИЦИНУ СРЕДИ СТАФИЛОКОККОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ОСТЕОМИЕЛИТОМ

Розова Л.В. 1 Годовых Н.В. 1
1 ФГБУ «РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова» Минздрава России
При микробиологическом исследовании содержимого ран, свищей у больных хроническим остеомиелитом взято 308 проб, выявлено 230 штаммов различных видов стафилококков. В последнее время, клиндамицин из-за его активного проникновения в ткани, является одним из наиболее эффективных антибиотиков в лечении инфекций, вызванных Staphylococcus aureus. Выявленные чувствительные к клиндамицину стафилококки могут проявить индуцибельную резистентность во время проводимого лечения. Проведено определение индуцибельного типа резистентности к клиндамицину с помощью постановки диско-диффузионого D –теста у стафилококков (29 штаммов), устойчивых к эритромицину и восприимчивых к клиндамицину. Индуцибельный тип резистентности выявлен у 9 (5,2 %) штаммов S. aureus и 8 (14,3 %) коагулазонегативных стафилококков. За исследуемый период в «РНЦ «ВТО» частота распространения индуцибельного фенотипа устойчивости к клиндамицину среди стафилококков у больных хроническим остеомиелитом составила 7,4 %. Для формирования стратегии антибактериальной терапии на региональном уровне необходимо проведение микробиологического мониторинга.
индуцибельный тип резистентности
стафилококки
клиндамицин
хронический остеомиелит
1. Методические рекомендации по микробиологической диагностике раневых инфекций в лечебно-диагностических учреждениях армии и флота / В.М. Добрынин, И.А. Добрынина, В.В. Кацалуха и др. – СПб. НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, 1999. – С. 4–62.
2. Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клиникодиагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений: Приказ № 535 МЗ СССР. – М., 1985. – 126 с.
3. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания МУК 4. 2. 1890 – 04 // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия – 2004. – Т. 6, № 4. – С. 306–359.
4. Сидоренко С.В., Тишков В.И. Молекулярные основы резистентности к антибиотикам // Успехи биологической химии. – 2004. – Т. 44. – С. 263–306.
5. Clinical and laboratory standards institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing; seventeenth informational supplement // Clinical Laboratory Standards Institute. – 2007. – Vol. 2, № 1.
6. Delialioglu N. Inducible clindamycin resistance in staphylococci isolated from clinical samples / Delialioglu N., Aslan G., Ozturk C., Baki V., Sen S., Emekdas G. // Jpn J. Infect Dis. – 2005. – Vol. 58. – Р. 104–106.
7. Deotale V. Inducible clindamycin resistance in Staphylococcus aureus isolated from clinical samples / Deotale V., Mendiratta D.K., Raut U., Narang P. // Indian J. Med. Microbiol. – 2010. – Vol. 28. – Р. 124–126.
8. Drinkovic D. Clindamycin treatment of Staphylococcus aureus expressing inducible clindamycin resistance / Drinkovic D., Fuller E.R., Shore K.P., Holland D.J., Ellis-Pegler R. // J. Antimicrob Chemother. – 2001. – Vol. 48, № 2. – Р. 315–316.
9. Feibelcorn K.R., Crawford S.A., McElmeel M.L., Jorgensen J.H. Practical disk diffusion method for detection of inducible clindamycin resistance in Staphylococcus aureus and coagulase‐negative staphylococci / Feibelcorn K.R., Crawford S.A., McElmeel M.L., Jorgensen J.H. // J. Clin. Microbiol. – 2003. – Vol. 41, № 10. – Р. 4740–4744.
10. Sedighi I. D-Test method for detection of inducible clindamycin resistance in Staphylococcus aureus / Sedighi I., Mashouf R.Y., Pak N., Rabiee M.A.S. // Iran J. Pediatr. – 2009. – Vol. 19, № 3. – Р. 293–297.

Стафилококк признан одним из наиболее распространенных возбудителей различных инфекций человека. Устойчивость к антимикробным препаратам среди стафилококков является растущей проблемой. Это привело к возобновлению интереса к использованию макролидов, линкозамидов и стрептограминов [6, 7]. Макролиды, линкозамиды и стрептограмины были объединены в одну группу (МЛС), это связано с общностью их механизмов действия и резистентности к ним микроорганизмов. Устойчивость к препаратам группы МЛС может быть связана с модификацией мишени действия, их активным выведением и быстрой инактивацией [4].

Наиболее распространенным и клинически важным механизмом резистентности стафилококков является метилирование. Известны два основных типа экспрессии устойчивости, связанной с метилированием: конститутивный и индуцибельный. При конститутивном типе синтез фермента метилазы (соответственно модификация мишени) происходит постоянно и не зависит от внешних условий, и бактерии проявляют перекрестную устойчивость ко всем макролидам, линкозамидам и стрептограминам. При индуцибельном – фермент синтезируется только в ответ на появление в окружающей среде антибиотиков. Штаммы с индуцибельным характером экспрессии метилаз, устойчивые к 14- и 15-членным макролидам, сохраняют чувствительность к 16 -членным макролидам и стрептограминам [4].

В последнее время, клиндамицин из-за его активного проникновения в ткани, является одним из наиболее эффективных антибиотиков в лечении инфекций, вызванных Staphylococcus aureus, особенно кожи и мягких тканей и остеомиелита [8].

Тем не менее выявленные чувствительные к клиндамицину стафилококки могут проявить индуцибельную резистентность во время проводимого лечения. На основании проведенных исследований было сделано заключение, что резистентные к эритромицину и чувствительные к клиндамицину стафилококки в ходе антибиотикотерапии могут приобретать резистентность, что и приводит к неэффективности проводимого лечения. Исходя из этого, возникает необходимость определения индуцибельного типа резистентности к клиндамицину с помощью постановки диско-диффузионого D-теста, для выявления антагонизма между клиндамицином и эритромицином [9, 10].

Цель исследования: выявление частоты встречаемости индуцибельного типа резистентности к клиндамицину среди стафилококков, выделенных у больных хроническим остеомиелитом, леченных в Российском научном центре «Восстановительная травматология и ортопедия» им. академика Г.А. Илизарова.

Материалы и методы исследования

Исследование проводилось в 2013–2014 гг. При микробиологическом исследовании содержимого ран, свищей у больных хроническим остеомиелитом взято 308 проб и выявлено 230 штаммов различных видов стафилококков. Идентификация бактерий и их антибиотикочувствительность проводилась как в соответствии с общепринятыми рекомендациями, так и при помощи баканализатора «WalkAway-40 Plus» («Siemens»), с использованием коммерческих микротест-систем [1, 2, 3]. Нами проведено определение индуцибельного типа резистентности к клиндамицину с помощью постановки диско-диффузионого D-теста у 29 штаммов стафилококков, устойчивых к эритромицину и восприимчивых к клиндамицину [5].

roz1.tif

Рис. 1. Д-зона ингибирования вокруг диска с клиндамицином указывает на индуцибельный тип резистентности

Методика постановки D-теста и интерпритация результатов осуществлялась следующим образом: суспензию Staphylococcus spp. мутностью 0,5 McFarland наносили на поверхность Мюллера-Хинтон агара в чашке Петри, затем помещали диски с эритромицином (15 мкг) и клиндамицином (2 мкг) на расстоянии между ними 15 мм. После инкубации при 37°C в течение 18–24 часов уплощение зоны (D-образные) вокруг клиндамицина указывало на индуцибельный тип резистентности к клиндамицину (рис. 1). Если D-тест положительный (D+), то изолят следует считать устойчивым к клиндамицину, если отрицательный (D-), то чувствительным.

Результаты исследования и их обсуждение

По результатам идентификации установлено, что видовой состав выявленных стафилококков включал: коагулазоположительный вид S. aureus – 174 шамма и ряд коагулазонегативных видов (S. epidermidis, S. hyicus, S. auricularis, S. haemolyticus, S. hominis, S. capitis, S. saprophyticus) – 56 штаммов. Среди выявленных стафилококков S. aureus встречался в три раза чаще (рис. 2).

roz2.tif

Рис. 2. Частота выявления Staphylococcus aureus и коагулазонегативных стафилококков из ран и свищей у больных хроническим остеомиелитом

Проведена сравнительная характеристика восприимчивости стафилококков к эритромицину и клиндамицину (рис. 3). Было установлено, что чаще встречаются штаммы, резистентные к эритромицину, причем у метициллинрезистентных коагулазонегативных стафилококков (MRCNS) эта разница составляла 36,4 %.

Среди метициллинрезистентных штаммов устойчивых к клиндамицину и эритромицину лидирующее положение занимает S. aureus, среди метициллинчувствительных – коагулазонегативные стафилококки (CNS).

roz3.wmf

Рис. 3. Сравнительная характеристика резистентности эритромицина и клиндамицина к стафилококкам. Примечание. MRSA – метициллинрезистентные Staphylococcus aureus, MRCNS – метициллинрезистентные коагулазонегативные стафилококки, MSSA – метициллинчувствительные Staphylococcus aureus, MSCNS – метициллинчувствительные коагулазонегативные стафилококки

Сравнение различных типов восприимчивости стафилококка к клиндамицину и эритромицину

ФЕНОТИП

(Структура восприимчивости)

S. aureus

Коагулазонегативные

стафилококки

Всего

(n = 174)

( %)

(n = 56)

( %)

(n = 230)

( %)

CL–S, ER–S

130

74,7

29

51,8

159

69,1

CL–R, ER–R

30

17,2

10

17,8

40

17,4

CL–R, ER–S

1

0,6

1

1,8

2

0,9

CL–S (D–), ER–R

4

2,3

8

14,3

12

5,2

CL–S (D+), ER–R

9

5,2

8

14,3

17

7,4

Всего

174

100

56

100

230

100

Примечание. CL-S = Клиндамицин чувствительный, CL–R = Клиндамицин резистентный ER–S = Эритромицин чувствительный, ER–R = Эритромицин резистентный, D – тест положительный = (D+), D – тест отрицательный = (D).

Структура восприимчивости стафилококков к клиндамицину и эритромицину рассмотрена в таблице. Как видно из таблицы, одновременно к обеим препаратам проявили чувствительность S. aureus – 74,7 % и CNS – 51,8 %, устойчивость (конститутивный тип резистентности) проявили 17,2 % S. aureus и 17,8 % CNS. На D-тест было исследовано 29 штаммов (S. aureus – 13 и CNS – 16), индуцибельный тип резистентности выявлен у 9 (5,2 %) и 8 (14,3 %) соответственно. Также выявлено по одному штамму стафилококков, резистентных к клиндамицину и чувствительных к эритромицину.

Согласно нашим исследованиям у больных хроническим остеомиелитом выявлен высокий процент штаммов S. aureus, чувствительных к эритромицину (75,3 %) и клиндамицину (77,0 %), индуцибельная резистентность к клиндамицину составила 5,2 %. Коагулазонегативные стафилококки были менее чувствительны к эритромицину, чем S. aureus, их устойчивость составила 46,6 %, чаще проявлялась индуцибельная резистентность к клиндамицину (14,3 %).

Заключение

Для принятия соответствующих решений терапии необходимы точные данные чувствительности выявленных микроорганизмов. Характер резистентности стафилококков к макролидам варьируется в разных регионах. За исследуемый период в «РНЦ «ВТО» частота распространения индуцибельного фенотипа устойчивости к клиндамицину среди стафилококков у больных хроническим остеомиелитом составила 7,4 %. D-тест является простым и надежным способом для определения индуцибельной резистентности стафилококков к группе МЛС в обычной микробиологической лаборатории. Для формирования стратегии антибактериальной терапии на региональном уровне необходимо проведение микробиологического мониторинга.


Библиографическая ссылка

Розова Л.В., Годовых Н.В. ИНДУЦИБЕЛЬНЫЙ ТИП РЕЗИСТЕНТНОСТИ К КЛИНДАМИЦИНУ СРЕДИ СТАФИЛОКОККОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ОСТЕОМИЕЛИТОМ // Успехи современного естествознания. – 2015. – № 3. – С. 70-73;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=34739 (дата обращения: 22.11.2017).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252