Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,653

ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕНОЛЬНОГО КОМПЛЕКСА ЛИСТЬЕВ ЛИЛИИ БЕЛОЙ (LILIUM CANDIDUM (L.))

Вдовенко-Мартынова Н.Н. 1 Кобыльченко Н.В. 1 Блинова Т.И. 1
1 Пятигорский медико-фармацевтический институт – филиал ГБОУ ВПО «ВолгГМУ» Минздрава России
Объект исследований – лилии белой листья, заготовленные с растений Lilium candidum L., семейства Liliaceae в Ботаническом саду Пятигорского медико-фармацевтического института. Цель исследования – изучение фенольных соединений в анализируемом сырье. Качественный состав и количественное определение фенольных соединений в исследуемых образцах воздушно-сухого сырья определяли, используя качественные реакции, метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Выявлено 8 соединений, из них идентифицировано 5 веществ фенольной природы: галловая кислота, хлорогеновая кислота, ферулловая кислота, цикориевая кислота, эпигаллокатехингаллат. Содержание суммы идентифицированных фенольных соединений составило 82,37 % от всех обнаруженных данным методом соединений.
лилия белая Lilium candidum L.
фенольные соединения
высокоэффективная жидкостная хроматография
1. Ботанический сад – исторический экскурс и перспективы развития / В.Л. Аджиенко, А.В. Воронков, Н.Н. Вдовенко-Мартынова и др. //Фармация и фармакология. – 2013. – № 1. – С. 24–28.
2. Вдовенко-Мартынова Н.Н., Кобыльченко Н.В., Блинова Т.И. Исследование фенольного комплекса ежевики сизой Rubus caesius (L.) флоры Северного Кавказа // Традиционная медицина. – 2012. – № 5. – С. 204–206.
3. Вдовенко-Мартынова Н.Н., Кобыльченко Н.В., Блинова Т.И. Тёрн ( Prunus spinosa L.) Химическое и фармакогностическое исследование, применение в медицинских и пищевых целях // Вопросы. Гипотезы. Ответы: Наука ХХI века: коллективная монография. – Краснодар, 2013. – Книга 5. – 284 с.
4. Государственная фармакопея СССР. – Вып.1 : Общие методы анализа / МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1987. – 336 с.
5. Клышев Л.К. Флавоноиды растений (распространение, физико-химическиесвойства, методы исследования) / Л.К. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина. – Алма-Ата: Наука «Казахской ССР», 1978. – 220c .
6. Попова О.И., Вдовенко-Мартынова Н.Н., Круглая А.А. и др. Чистота лекарственного растительного сырья – показатель безопасности применения // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. – 2012. – Т. 14, № 3(5). – С. 748–750.

Развитие фармацевтического рынка доказывает, что интерес к лекарственным растениям, как к источнику сырья для производства эффективных и безопасных лекарственных средств, является стабильным, несмотря на различные периоды в развитии Российской фармации и изменения экономической ситуации в нашей стране. Так, растительные источники флавоноидов обладают широким спектром фармакологической активности и в настоящее время составляют одну из наиболее крупных групп лекарственного сырья, востребованного в медицине. Актуальной задачей является поиск перспективных лекарственных средств растительного происхождения, разработка современных методов и приёмов стандартизации, определяющих его качество [3, 6]. Перспективным для создания фитопрепаратов является лилия белая (Lilium candidum L.), семейства Liliaceae. Химический состав сырья лилии белой (Lilium candidum L.) изучен недостаточно, однако лечебное действие народная медицина знает хорошо. В настоящее время сырье Lilium candidum L. широко используется в парфюмерно-косметической промышленности, в гомеопатии.

Целью данной работы явилось изучение фенольных соединений лилии белой листьев.

Материалы и методы исследования

Объект нашего исследования – лилии белой листья, заготовленные с растений Lilium candidum L., семейства Liliaceae в Ботаническом саду Пятигорского медико-фармацевтического института [1].

Качественный состав и количественное определение фенольных соединений в исследуемых образцах воздушно-сухого сырья определяли, используя качественные реакции, метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [2].

Определение флавоноидов проводили, применяя качественные реакции: цианидиновую пробу, с водным раствором хлорида железа (Ш), водным раствором натрия гидрооксида, раствором ацетата свинца; дубильных веществ: с раствором желатина, хинина сульфата, при добавлении 1 % раствора железоаммониевых квасцов, наблюдалось черно-синее окрашивание (гидролизуемые дубильные вещества) [4, 5]. Для более точного определения использовали метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Для этого образцы исследуемого сырья – лилии листья – измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм (ГОСТ 214-83). Измельченное сырье в количестве 2,0 г помещали в колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 20 мл спирта этилового 70 %. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение часа с момента закипания спиртоводной смеси. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили объем спиртом этиловым 70 % до метки. Параллельно готовили серию растворов стандартных образцов фенольных соединений 0,05 % в спирте этиловом 70 %: рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, цикориевой кислоты, коричной кислоты, о-кумаровой, эпигалокатехингаллата, танина, гиперозида, геспередина, апигенина, феруловой кислоты, эпикатехина, эскулетина, кумарина, дигидрокверцетина, кемпферола, нарингенина. По 50 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали. Для анализа фенольных соединений использовали высокоэффективный жидкостный хроматограф «GILSON-305» (Франция) с ручным инжектором RHEODYNE-7125 USA, результаты обрабатывали с помощью компьютерной программы «МультиХром» В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6x250 мм Kromasil С 18, размер частиц 5 микрон. Подвижная фаза: метанол-вода-фосфорная кислота концентрированная, в соотношении 400:600:5. Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 60 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора «GILSTON» UV/VIS модель 151, при длине волны 254 нм. Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме проб с временами удерживания стандартных растворов. Оценку количественного соотношения идентифицированных веществ в исследуемых образцах проводили по площади пиков, используя метод внутренней нормализации.

Идентификация фенольных соединений листьев Lilium candidum L. методом ВЭЖХ

№ п/п

Время, мин

Высота, mV

Площадь,

mV·сек

ФО

Содержание, %

Название

1

3,81

64,46

1030,10

1,000

8,57

галловая кислота

2

4,074

96,01

2672,41

1,000

22,22

ЭГКГаллат

3

4,621

53,70

3448,69

1,000

28,68

хлорогеновая кислота

4

6,775

47,32

2236,07

1,000

18,60

цикориевая кислота

5

8,758

23,28

1457,15

1,000

12,12

н

6

10,66

8,42

516,57

1,000

4,30

феруловая кислота

7

14,88

7,29

431,40

1,000

3,59

н

8

22,85

3,39

232,46

1,000

1,93

н

vdov1.tif

Хроматограмма водно-спиртового извлечения листьев Lilium candidum L

Результаты исследования и их обсуждение

Хроматографические характеристики соединений, обнаруженных методом ВЭЖХ в исследованном извлечении, приведены в таблице.

Методом ВЭЖХ в водно-спиртовом (70 %) извлечении лилии белой листьев обнаружено 8 соединений, из них идентифицировано 5 веществ фенольной природы: гидроксикоричные кислоты (цикориевая, хлорогеновая, феруловая, галловая), полифенольные соединения (эпигаллокатехингаллат). Содержание суммы идентифицированных фенольных соединений составило 82,37 % от всех обнаруженных данным методом соединений (таблица, рисунок).

Выводы

Таким образом, в листьях Lilium candidum L. методом ВЭЖХ было обнаружено 8 соединений, из них идентифицировано 5 веществ фенольной природы: галловая, цикориевая, хлорогеновая, ферулловая кислоты, эпигаллокатехингаллат.


Библиографическая ссылка

Вдовенко-Мартынова Н.Н., Кобыльченко Н.В., Блинова Т.И. ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕНОЛЬНОГО КОМПЛЕКСА ЛИСТЬЕВ ЛИЛИИ БЕЛОЙ (LILIUM CANDIDUM (L.)) // Успехи современного естествознания. – 2015. – № 9-1. – С. 100-102;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=35536 (дата обращения: 19.07.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252