Scientific journal
Advances in current natural sciences
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,653

Одним из последствий применения химиотерапии при раке молочной железы (РМЖ), возможно, является повышенная частота диабета среди пациентов с РМЖ. Для снижения токсичности исследуемый синтетический цитостатик 4-(3´-гидрокси-4´-метоксифенил)кумарин (АС, аналог известного природного цитостатика комбретастатина А-4) был включен в липидный бислой липосом (Lp) в виде липофильного пролекарства - олеоильного производного (AC-Ole), полученного в соответствии со схемой 1.

С целью адресной доставки к опухоли липосомы оснащали тетрасахаридным лигандом селектинов, который встраивали в мембрану липосом (SiaLeX-PEG-DG). Известно, что селектины избирательно экспрессируются в районе роста опухоли на эндотелии сосудов, прорастающих de novo в опухоль. Целью работы было сравнить противоопухолевые эффекты липосомальных форм АС-Ole и исходного АС, а также проверить, может ли помочь включение цитостатика в липосомы избежать диабетоподобных явлений у пролеченных мышей-опухоленосителей.

p

Схема 1

Липосомы на основе яичного фосфатидилхолина (PC) и фосфатидилинозита из S. cerevisiae (PI) в PBS получали методом последовательной экструзии через поликарбонатные фильтры с размерами пор 200 и 100 нм. Клетки культуры рака молочных желез Wnt-1 перевивали самкам линии C57BL/6 (106/мышь) сингенно. После появления пальпируемых опухолей мышам вводили в.в. 4-кратно с интервалом в неделю по 0.2 мл 7 мМ раствора АC (37 мг/кг) в РВS-5% Tween 80 (n=5), или дисперсий липосом состава PC/PI/AС-Ole(+/-SiaLeX-PEG-DG), 8:1:0.7:0.2) (мол.) в 1/3 экв. дозы по AС (n=6/7). Контрольная группа (n=5) получала одновременно в.в. по 0.2 мл буфера (PBS) на мышь. Противоопухолевый эффект оценивали по торможению роста опухолей и улучшению выживания опухоленосителей в течение трех месяцев после начала лечения. Уровень глюкозы в крови измеряли прибором Aссu-Chek Active (Roche, Germany).

В выбранном режиме введения ни одна из форм препарата не привела к достоверному улучшению рассматриваемых показателей по сравнению с контролем (табл. 1, 2). Однако, доля выживших мышей, пролеченных интактным препаратом, была несколько выше по сравнению с липосомальными формами
АС-Ole. На момент начала лечения, у около половины животных опухоли были размером не более 1 мм (0.6±0.3 мм), они составляли подгруппу 1 в своей группе. Самки с опухолями более 1 мм (1.9±0.7 мм) составляли подгруппу 2 в своей группе. Мыши с наименьшим начальным размером опухоли (подгруппа 1), пролеченные адресными липосомами, продемонстрировали тенденцию к замедлению роста опухоли (табл. 1) и улучшению выживания (табл. 2) по сравнению с контролями.

Гиперглюкозурия наблюдалась у пролеченных АС мышей уже после первого введения препарата. Тогда как введение липосомальных форм АС не привело к повышению уровня глюкозы в крови подопытных животных ни в начальные, ни в конечные сроки наблюдения.

Таблица 1

Динамика роста опухоли (диаметр, мм) в целом по группам и в подгруппе 1

 

n

Группа/день*

0

6

8

15

20

27

34

44

54

64

74

82

В целом

5

PBS

1.2

3.2

3.2

5.8

7.6

9.6

11.6

14.3

16.5

17.9

20.5

23.2

5

АС

1.1

3.6

3.7

6.9

7.3

9.8

12.4

14.1

15.6

17.3

18.8

20.4

6

AC-Ole/Lp

1.3

3.5

3.7

7.5

8.3

10.3

12.2

13.9

15.5

16.8

18.5

20.2

7

AC-Ole/Lp-SiaLeX

1.1

3.0

3.8

5.3

6.1

8.05

9.9

12.1

14.3

13.8

16.0

18.2

Под-группа 1

3

PBS

0.5

1.5

1.7

3.6

5.3

9.7

12.7

14.2

17.4

20.5

23.7

23.2

3

АС

0.5

1.3

1.3

4.8

4.9

9.3

10.3

12.5

14.8

17.0

19.3

20.4

4

AC-Ole/Lp

0.9

2.1

2.2

7.1

7.8

12.0

13.9

15.8

17.4

19.4

21.4

20.2

3

AC-Ole/Lp-SiaLeX

0.6

1.0

1.3

2.1

2.0

5.9

8.4

10.9

13.3

15.8

18.3

18.2

* - дни после начала лечения.

Таблица 2

Параметры выживания (СПЖ, средняя продолжительность жизни)

 

Группы

n

СПЖ, дни

Выживание, %

В целом

по группам

PBS

5

78.8

60

АС

5

86.5

83

AC-Ole/Lp

6

79.5

67

AC-Ole/Lp-SiaLeX

7

83.5

67

Подгруппа 1

(начальный диаметр

<1 мм)

PBS

3

79.7

67

АС

3

77.0

67

AC-Ole/Lp

4

86.8

75

AC-Ole/Lp-SiaLeX

3

96.0

100

В итоге, было показано, что в используемой модели адресные липосомы с олеоильным производным 4-(3´-гидрокси-4´-метоксифенил)кумарина оказали наиболее выраженный противоопухолевый эффект, особенно в подгруппе с наименьшим размером опухолевых узелков на момент начала лечения. Введение препарата в виде липофильного пролекарства в липосомальной форме действительно снизило токсическое действие и диабетоподобные явления у мышей-опухоленосителей. Однако для достижения существенного противоопухолевого эффекта, по-видимому, следовало увеличить дозу препаратов за счет увеличения кратности инъекций.

Работа выполнена при финансовой поддержке проектов РФФИ №09-03-00647-a и МД-5606.2010.3.