Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,653

ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ТЕМПЕРАТУРНОГО РЕЖИМА ИНКУБАЦИИ НА АДГЕЗИВНУЮ СПОСОБНОСТЬ ИЗОЛЯТОВ ГРИБОВ РОДА CANDIDA, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ РАЗЛИЧНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ НИШ

Хомич Ю.С. Бурмистрова А.Л. Самышкина Н.Е. Седова А.В.

Условно-патогенные грибы рода Candida в качестве сапрофитов часто находятся на поверхности слизистых оболочек человека и животных, однако при некоторых нарушениях функции иммунной системы они вызывают поражения слизистых оболочек, кожи и внутренних органов. Считается, что большинство штаммов, выступающих в качестве причины заболевания, являются комменсалами самих пациентов. В тоже время, возрастающая частота кандидозов, в т.ч. вызванных Candida non albicans, может свидетельствовать об импорте инфекции и (или) о замене, в силу каких-то обстоятельств, «добропорядочных» комменсалов на агрессивные («дикие») штаммы. Природные штаммы грибов и других микроорганизмов становятся клинически значимыми и, пройдя определенную ступень адаптации в организме человека, они могут стать более жесткими конкурентами в отношении клинических изолятов, т.к. имеют более выраженную конкурентоспособность.

Начальным и критическим по своему значению этапом колонизации слизистых оболочек грибами Candida, определяющим возможность дальнейшего развития микотического процесса, является адгезия (прикрепление) грибов к поверхности эпителиальных клеток. На этот процесс оказывают влияние многообразные факторы, в т.ч. характер и температура инкубационной среды.

Т.о., целью данного исследования было оценить влияние температурного режима инкубации на адгезивную способность различных изолятов грибов рода Candida к буккальному эпителию. Буккальный эпителий был выбран в качестве универсальной модели для оценки адгезивных свойств грибов. Ранее нами было показано, что вагинальные изоляты проявляют одинаковую адгезивную способность к буккальному и вагинальному эпителию (Хомич Ю.С., Бурмистрова А.Л., 2005).

Материалы и методы

Было изучено 72 культуры грибов. Из них:

  1. 35 культур выделены из влагалища женщин (18 - 35 лет) с различной генитальной патологией (эрозии шейки матки, вагиниты, кольпиты), имеющих дисбиоз влагалища;
  2. 20 культур выделены из ротовой полости условно здоровых лиц;
  3. 15 природных изолятов грибов рода Candida, выделенных из корма рыб, имаго комаров и ЖКТ кивсяка;
  4. 2 штамма C.albicans АТСС 2091 и 10231.

Все вагинальные и оральные изоляты были представлены видом Candida albicans. Природные штаммы были любезно предоставлены кафедрой биологии почв факультета почвоведения МГУ. Среди них было 11 коллекционных (три культуры - Candida guilliermondii, четыре - Candida tropicalis, одна - Candida maltosa, одна - Candida santamariae, две - Rhodotorula rubra) и 4 музейные культуры. Музейные культуры были реидентифицированы нами как C.guilliermondii (2), R. rubra и Candida kefyr («Auxocolor»).

Все культуры оценивали по адгезивной способности к буккальному эпителию при рН 7,0 (физиологический рН ротовой полости) при 24°С и 37°С (температура тела человека). Эпителиальные клетки собирали с помощью сухого стерильного тампона из хлопка со слизистой внутренней поверхности щеки одного условно здорового донора.

С целью определения индекса адгезии (ИА) смешивали равные объемы эпителия и грибов при соотношении клеток 1:100 соответственно. Пробирки встряхивали в ротаторе 1 час при 24°С и 37°С, 70 об/мин. Затем готовили мазок, который окрашивали метиленовой синью. Для 100 эпителиальных клеток подсчитывали ИА - среднее количество адгезированных грибов в пересчете на один эпителиоцит.

Таблица 1.

Индекс адгезии различных изолятов грибов к буккальному эпителию

 

ИА при 37°С

ИА при 24°С

Вагинальные изоляты (n=35)

6,2±0,7

7,3±0,7

Оральные изоляты (n=20)

11,3±1,6

13,2±1,8

Природные изоляты (n=15)

3,8±0,6*

12,8±1,2*

Штаммы АТСС (n=2)

4,0±0,1**

8,1±0,1**

*p<0,005

** p<0,005

Результаты

Как видно из таблицы:

  1. Наибольший ИА к буккальному эпителию при 37°С показали оральные изоляты (11,3); при 24°С - оральные и природные изоляты (13,2 и 12,8 соответственно).
  2. Природные изоляты и АТСС штаммы показали достоверное увеличение адгезивной способности при температуре 24°С в сравнении с 37°С.
  3. Адгезивная способность клинических штаммов грибов также увеличивалась при 24°С в среднем в 1,2 раза (недостоверно).
  4. Природные изоляты продемонстрировали достаточно более выраженную адгезию при 24°С в сравнении с вагинальными штаммами, но равную адгезии оральных изолятов.
  5. Природные изоляты проявляют адгезивную способность к эпителию человека при 37°С, что позволяет говорить, что при определенных условиях они могут колонизировать экологические ниши человеческого организма.

Выводы

  1. Независимо от температуры оральные изоляты проявляют выраженную сайт-специфическую адгезию.
  2. Природные изоляты демонстрируют зависимость адгезивной способности от температурного режима: максимальный ИА при 24°С.
  3. При использовании в качестве контроля штаммов C.albicans ATCC необходимо учитывать, что на адгезивные свойства этих штаммов оказывает существенное влияние температурный режим (адгезия при 24°С в 2 раза выше, чем при 37°С).

Библиографическая ссылка

Хомич Ю.С., Бурмистрова А.Л., Самышкина Н.Е., Седова А.В. ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ТЕМПЕРАТУРНОГО РЕЖИМА ИНКУБАЦИИ НА АДГЕЗИВНУЮ СПОСОБНОСТЬ ИЗОЛЯТОВ ГРИБОВ РОДА CANDIDA, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ РАЗЛИЧНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ НИШ // Успехи современного естествознания. – 2010. – № 9. – С. 102-104;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=8824 (дата обращения: 20.07.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252