Нашими исследованиями [3] была установлена противоанемическая активность экстракта из надземной части медуницы мягчайшей Pulmonaria mollissima A.Kern. и показана возможность монотерапии указанным экстрактом в дозе 37,5 мг/кг модельной ЖДА у подопытных крыс. Подобный фармакологический эффект связан, в первую очередь, с содержанием в сырье м.мягчайшей микроэлементов кроветворного комплекса (Fe, Mn, Cu, Co), среди которых определяющее значение имеет структурообразующий элемент гемоглобина - железо. Фармакологическое действие ионов железа поступающих в желудочно-кишечный тракт зависит от их валентности. Ион Fe2+ поступает в организм из растительного экстракта в виде растворимых солей органических кислот. Ион Fe3+ при значениях pH среды соответствующей pH среды кишечника (слабощелочной) должен выпадать в осадок и только его нахождение в составе хелатных комплексов с фенольными соединениями или в составе полисахаридов может предотвратить выпадение Fe3+ в осадок и тем самым обеспечить его участие в формировании фармакологического эффекта.
Известными фармакопейными методами [1] в составе сухого экстракта было определено содержание полисахаридно-белкового, комплекса, дубильных веществ, флаваноидов и общей золы (таблица 1)
Таблица 1. Содержание основных групп биологически-активных соединений в экстракте из надземной части м.мягчайшей (в %, в пересчете на абсолютно сухую массу)
|
Полисахаридно-белковый комплекс |
Дубильные вещества в пересчете на танин |
Минеральные вещества (зола общая) |
Флаваноиды |
|
47,5 |
20,0 |
30,0 |
2,5 |
Методами рентгено-флуоресцентного анализа и атомно-эмиссионной спектроскопии было определено содержание микроэлементов в нативном сырье м.мягчайшей, собранной в фазе цветения, в сухом экстракте из данного сырья полученном по методике [3], а также в составе водорастворимой полисахаридной фракции из суммарного извлечения выделенной по методике [4]. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Таблица 2. Содержание микроэлементов в объектах исследования (в мкг/г, в пересчете на абсолютно-сухую массу)
|
Микроэлементы* Объект |
Fe |
Mn |
Cu |
Co |
|
нативное сырье |
500,0 |
140,0 |
6,5 |
0,2 |
|
экстракт |
167,0 |
96,0 |
2,5 |
0,06 |
|
полисахаридная фракция |
425,0 |
20,0 |
43,0 |
0,5 |
* Примечание: Воспроизводимость результатов определения σ,% составила - 6,0; 4,0; 6,0 и 18,0 при определении концентрации Fe, Mn, Cu и Co соответственно.
С учетом выявленных [4] количественных соотношений экстрактивных веществ m1 (~ 40%) в суммарном извлечении из нативного сырья и водорастворимых полисахаридов m2 были рассчитаны коэффициенты извлекаемости микроэлементов k1 и k2 равные: и , которые характеризуют долю микроэлементов переходящую из нативного сырья с содержанием микроэлементов m0 в экстракт и долю микроэлементов в составе экстракта связанную с полисахаридной фракцией (таблица 3)
Таблица 3. Расчетные коэффициенты извлекаемости микроэлементов
|
Коэффициенты извлекаемости |
Fe |
Mn |
Cu |
Co |
|
k1 |
0,33 |
0,69 |
0,38 |
0,30 |
|
k2 |
0,64 |
0,05 |
0,27 |
0,21 |
Как следует из анализа коэффициентов извлекаемости 64% железа переходящего из нативного сырья в суммарное извлечения и соответственно в сухой экстракт связано с полисахаридной фракцией. В этом смысле, можно говорить о соосождении ионов железа с полисахаридно-белковым комплексом. В нативном сырье железо, вероятнее всего, содержится в виде суммы двух- и трехвалентных ионов с преобладанием Fe3+, чем и обуславливается существенно более низкая извлекаемость Fe по сравнению с Mn (растворимость солей Fe3+ ниже чем солей Mn).
Анализ результатов сравнительных фармакологических исследований экстракта м.мягчайшей [3] и синтетического препарата мальтофер (Fe3+-гидроксид-полимальтозный комплекс) показал, что при их близкой противоанемической активности доза элементарного железа, получаемого подопытными животными в составе экстракта на несколько порядков ниже, чем при введении мальтофера. При введении животным экстракта м.мягчайшей в дозе 37,5 мг/кг содержание введенного элементарного железа составляет 6,25 мкг/кг. Мальтофер вводился подопытным животным в дозе, в которой содержание элементарного железа составляло 2,85 мг/кг.
Данное обстоятельство, вероятнее всего, связано с комплексностью терапевтического воздействия на организм животного препарата растительного происхождения, в отличие от синтетического препарата, который может рассматриваться исключительно как прямой источник элементарного железа.
На основании полученных результатов можно предполагать следующий механизм противоанемического действия экстракта из надземной части м.мягчайшей:
В составе экстракта 64% всего элементарного железа находится в трехвалентной форме и связано с полисахаридной фракцией. В этом смысле, структура действующего комплекса железа подобна структуре препарата мальтофер (полисахаридная фракция препарата образуется из одного мономера - мальтозы), с той разницей, что полисахаридная матрица представляет собой белково-полисахаридный комплекс. Белковая часть данного комплекса представлена аминокислотами, а углеводная часть комплекса представлена глюкозой, галактозой, маннозой, арабинозой, ксилозой, рамнозой и глюкуроновой кислотой [2]. Вполне вероятно, что в организме подопытного животного экстракт м.мягчайшей резко повышает усвояемость железа поступающего с пищей, т.е. выполняет гастромодулирующую функцию.
Важно также отметить, что высокое содержание дубильных веществ в экстракте м.мягчайшей (~20,0%), а также известная химазная активность (а соответственно и связанная с этим активация одного из факторов свертывания крови) полисахаридного комплекса с указанным углеводным составом, позволяет объяснить и установленную противогеморрагическую активность препаратов медуницы [5]
Таким образом, противоанемическая активность экстракта м.мягчайшей имеет как патогенетическое действие, направленное на повышение содержания железа за счет усиления его усвояемости из состава пищи, так и этиотропное действие за счет модуляции свертывающей системы крови.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Государственная фармакопея СССР: Вып.1 Общие методы анализа/МЗ СССР. - 11-е изд.- М.: Медицина, 1987.-336с.
- Киселева А.В. Биологически-активные вещества лекарственных растений Южной Сибири/А.В.Киселева, Т.А. Волхонская, В.Е.Киселев.-Новосибирск, ЦСБС, «Наука Сиб.отд.», 1991.-135с.
- Круглов Д.С., Ханина М.А., Третьякова О.В. Оценка фармакологической активности экстракта из надземной части Pulmonaria mollissima //Фундаментальные исследования. - 2006. - №1. - с.28-29.
- Круглов Д.С., Ханина М.А.Количественное определение биологически активных соединений Pulmonaria mollissima //Успехи современного естествознания.- 2006.- №2.- с.31.
- Britisch Herbal Pharmacopoeia.- Bournemouth, B.H.M.A., 1983.-256p.