Исследовали венозную кровь 22 небеременных женщин (28,3±7,5 лет). Ее получали в объеме 4 мл и смешивали с 1 мл 5% раствора цитрата натрия. Оценку ОРЭ проводили через 4-6 часов по Идельсону Л. И. (1974) [4] в нашей модификации, заключающейся в замене раствора NaCl c 0,40% на 0,42% (при этом число гемолизированных эритроцитов приближается к 50%). В 3 ряда пробирок (по 6-9 в каждом) вносили по 0,1 мл крови; в 1-й ряд добавляли по 0,1 мл адреналина (в конечной концентрации от 10-13 до 10-5г/мл), во 2-й - по 0,1 мл ЛФХ (от 10-13 до 10-5г/мл), а в 3-й - 0,1 мл адреналина (10-13 -10-5г/мл) и 0,1 мл ЛФХ (10-6 г/мл). Через 5 минут во все пробирки добавляли 0,42% раствор NaCl (до 5 мл); их выдерживали 30 мин. при 18-20оС, центрифугировали (5 мин, 2000 об/мин) при 18-200С на центрифуге ОПн-8УХЛ4.2., измеряли оптическую плотность надосадочной жидкости на КФК-2 и рассчитывали процент гемолизированных эритроцитов. Различия оценивали по критерию Стьюдента и Манна-Уитни, считая их достоверными при р<0,05.
Установлено, что в контроле (0,1 мл крови + 4,9 мл 0,42% раствора NaCl) число гемолизированных эритроцитов составило 64,1±7,0% от общего их числа. Адреналин (табл.) в концентрациях 10-13, 10-12 и 10-11 г/мл повышал ОРЭ, но степень этого повышения не зависела от его концентрации в среде, что указывает на его неспецифичность. В концентрациях 10-10-10-5 г/мл адреналин вызвал (за счет активации β-АР?) более выраженное повышение ОРЭ, степень которого для концентраций 10-10-10-7 г/мл возрастала с их увеличением; для концентраций 10-6 и 10-5 г/мл она уменьшалась (за счет активации α-АР?). В концентрациях 10-13, 10-12 и 10-11 г/мл ЛФХ повышал ОРЭ, но степень этого повышения не зависела от его концентрации в среде, что также указывает на его неспецифичность. В концентрациях 10-10-10-5 г/мл ЛФХ незначительно (и слабее, чем адреналин) повышал ОРЭ (за счет активации специфических орфановых рецепторов, открытых [7] ?). При совместном действии с адреналином ЛФХ (10-6 г/мл) увеличивал его способность (достоверно - для концентраций 10-10, 10-9 и 10-6 г/мл) повышать ОРЭ. Это можно объяснить тем, что ЛФХ блокирует α-АР (при активации которых адреналин снижает ОРЭ), не влияя на β-АР, активация которых повышает ОРЭ. Результаты исследования подтверждают представление [5-7] о способности ЛФХ регулировать деятельность клеток.
Таблица 1. Число эритроцитов (М±m), гемолизированных в 0,42% растворе NаСl (в % к контролю) при наличии в среде адреналина (10-13-10-5 г/мл, 1), ЛФХ (10-13-10-5 г/мл, 2) и адреналина (10-13-10-5 г/мл) совместно с ЛФХ (10-6 г/мл, 3)
|
Концент-рация, г/мл |
Число наблюдений |
Адреналин |
ЛФХ |
Адреналин + ЛФХ |
|
1 |
2 |
3 |
||
|
10-13 |
10 |
54,0±7,3* |
57,7±9,1* |
49,8±7,7* |
|
10-12 |
10 |
59,2±6,2* |
53,9±8,8* |
46,8±7,4* |
|
10-11 |
10 |
56,5±6,8* |
59,5±8,5* |
42,7±6,5* |
|
10-10 |
22 |
48,5±6,1* |
51,2±6,1* |
32,8±4,9*bc |
|
10-9 |
22 |
50,0±5,5* |
51,7±5,7* |
32,7±5,3*abc |
|
10-8 |
22 |
43,5±5,8* |
52,0±5,6* |
36,5±5,0* |
|
10-7 |
12 |
34,0±6,1* |
47,4±7,9* |
34,4±7,6* |
|
10-6 |
19 |
43,7±5,9* |
52,0±6,0* |
32,5±5,4*bc |
|
10-5 |
12 |
49,8±8,1* |
50,4±6,4* |
31,8±7,5* |
*-различия с контролем достоверны, p<0,05, по критерию Стьюдента;
а, b и с - различия с 1 (a), 2 (b) и с ЛФХ в концентрации 10-6 г/мл (с) достоверны (p<0,05) по критерию Манна-Уитни.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Бабин А. П. и др.//Гемореология в микро- и макроциркуляции: Мат. межд. конф. Ярославль, 2005. С. 196.
- Длусская И. Г. и др. //Авиакосмич. и экол. мед. 1997. № 5. С. 64-70.
- Кленова Н.А., Власов Д.Н. //Актуальные проблемы медицины, биологии и экологии. Т. 2. Томск. 2003. С.282-283.
- Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М., 1987. С. 119- 120.
- Проказова Н.В. и др. //Биохимия. 1998.Т.63, в. 1. С. 38 - 46.
- Oka H. et al. //Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2000. V. 20. Р.244-250.
- Rikitake Y. et al. //ibid. 2002, V. 22. Р.2049- 2053.