Scientific journal

Advances in current natural sciences

ISSN 1681-7494

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 0,775

По данным генетического мониторинга во многих странах нарушения генома разной степени встречаются у 2-5% новорожденных, что влияет на показатели здоровья детского населения, а в будущем, и всей популяции. В структуре наследственных болезней доля тяжелых форм патологий составляет 2% [1,5,7]. Особенно остро стоит проблема детской заболеваемости, причиной которой являются наследственные заболевания (НЗ) и врожденные пороки развития (ВПР). Их вклад в структуру младенческой смертности уже достигает 20%. Лечение и инвалидизация таких детей является одной из причин снижения рождаемости. Установлено, что профилактика часто встречающихся НЗ (1:50000 и чаще) может на 50% снизить отягощенность этими патологиями [3]. Среди профилактических программ существенное место занимает мониторинг подобных болезней - система определения и контроля популяционных частот ВПР и НЗ, включающая изучение их динамики и этиологии, а также контроль тератогенов среды [2]. Подобного рода исследования служат основой для разработки мероприятий и рекомендаций по снижению риска и уровня ВПР и НЗ среди населения. Для проведения единого методического подхода обязательной регистрации подлежат наблюдаемые «внешние» пороки развития, легко выявляемые врачом, и пороки внутренних органов с высоким уровнем летальности, выявляемые при проведении цитологоанатомического исследования [3].

Сравнительный анализ результатов популяционно-генетических исследований на предмет составления регистра НЗ и ВПР проведен среди населения Муганской и Ширванской зон Азербайджана. В соответствии с правилами Европейского международного регистра ВПР (EUROCAT) [6], зарегистрированы наиболее легко диагностируемые врожденные аномалии: нарушения ЦНС, врожденные пороки сердца, врожденные патологии зрения, аномалии скелета, гемолитическая болезнь, большая талассемия, врожденная глухонемота, расщелина губы и/или неба, гемофилия, гипофизарный нанизм.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Материал собран в экспедиционных условиях в селах и в районных центрах Саатлинского, Сальянского, Джалилабадского районов Муганской зоны, а также Кобустанского и Ахсуинского районов Ширванской зоны с 2004 по 2005 гг. Для выявления больных с врожденной и наследственной патологией использованы списки ВТЭК ЦРБ. В селах при подворовом обходе семей пробандов составлены родословные и путем генеалогического анализа дифференцированы случаи ВПР и НЗ. Фенотипические частоты выявленных патологий определяли по методике Ли Ч. [4]. В качестве материала для анализов использовали образцы крови, забор которой производили из пальца в микропробирки с антикоагулянтом (гепарин или натриевая соль этилендиаминтетраацетата). Для выявления β-талассемии и недостаточности фермента глюкозо-6-фосфатдегидро-геназы среди школьников использованы скрининг-программы [8]. При идентификации типа мутации β-талассемии использован молекулярный метод высокотемпературной аллель-специфической амплификации, основанный по принципу метода полимеразно-цепной реакции [7,11]. Для выявления наследственных гемоглобинопатий использован метод электрофореза гемоглобина на ацетат-целлюлозных пленках и аналитический метод изоэлектрофокусирования гемоглобинов в полиакриламидно-амфолиновых пластинках c рН 3,5-9,5 [9,10].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Сравнительный анализ медико-генетических исследований, проведенных в Муганской и Ширванской зонах республики, свидетельствуют о высокой распространенности ВПР и НЗ в обследуемых районах (рис.1). Так, в Муганской зоне (I) установлено 27 клинических форм патологий с фенотипической частотой, варьирующей в пределах 0,0017 - 0,0429%, и 23 формы с частотой 0,0076 - 0,1388% в Ширванской зоне (II). Из рис.1 видно, что среди общей структуры заболеваемости наиболее распространены нарушения ЦНС и составляют, соответственно, 43,89% и 37,84%. Структура указанных пороков развития представлена наиболее обширно: в I зоне - до 13 форм, во II зоне - 8 клинических форм. На втором месте по распространенности в I зоне находятся аномалии скелета - 20,72%, во II - врожденные патологии зрения - 13,70%. По остальным патологиям наблюдается относительное единство. Так, среди популяций I и II зон врожденные пороки сердца встречаются с частотой 6,10 и 6,05%; врожденная глухонемота - 6,94 и 6,02%;гемолитическая болезнь - 7,21 и 6,88%; расщелина губы и/или неба - 6,84 и 5,19%; гемофилия - 2,67 и 3,04%; большая талассемия - 2,89 и 1,30%; гипофизарный нанизм - 1,98 и 2,63%, соответственно.

Сравнительный анализ фенотипических частот изученных патологий показал, что среднее значение данных показателей во II зоне выше, чем в I (табл.1).

Рис. 1. Частота ВПР и НЗ среди населения Муганской и Ширванской зон

1. Нарушение ЦНС; 2. Врожденные пороки сердца; 3. Глухонемота; 4. Аномалии скелета; 5. Гемолитическая болезнь; 6. Большая талассемия; 7. Гемофилия; 8.Врожденные пороки зрения; 9. Расщелина губы/нёба; 10. Гипофизарный нанизм.

Таблица 1. Фенотипические частоты патологий, установленных в Муганской и Ширванской зонах республики

При этом отмечено различие в проявлении частоты тех или иных пороков за исключением гемолитической болезни, средняя фенотипическая частота которой в обеих зонах максимальная - во II зоне - 0,0635%, в I - 0,0166%, и гипофизарного нанизма со сравнительно небольшой частотой - 0,0229% и 0,0046%, соответственно. Далее в I зоне следуют: расщепление губы и/или неба - 0,0160%, врожденные пороки зрения - 0,0154%, врожденные пороки сердца - 0,0137%, глухонемота - 0,0118%, нарушения ЦНС - 0,0094%, большая талассемия - 0,0053%, гемофилия - 0,0048%, аномалии скелета - 0,0035%. Во II зоне: глухонемота - 0,0556%, врожденные пороки сердца - 0,0550%, расщепление губы и/или неба - 0,0471%, нарушения ЦНС - 0,0437%, аномалии скелета - 0,0349%, врожденные пороки зрения - 0,0303%, гемофилия - 0,0273%, большая талассемия - 0,0118%.

Учитывая высокую частоту распространения b-талассемии в Азербайджане, актуальным является вопрос идентификации типа мутаций для данного заболевания. В Муганской зоне установлены несколько типов мутаций для b-талассемии. Так, при обследовании одной из семей в Саатлинском районе установлено, что мать имела точечную мутацию - замену нуклеотида гуанин на нуклеотид цитозин в 5-ой позиции первого интрона b-глобинового гена с фенотипом b⁺-талассемии (b⁺-IVS-1-5, Г-Ц), отец - точечную мутацию, замену нуклеотида гуанин на нуклеотид аденин в 110-ой позиции первого интрона b-глобинового гена с фенотипом b⁺-талассемии (b⁺-IVS-1-110, Г-А). Следовательно, больные дети с диагнозом большая b-талассемия имели генотип: b⁺-IVS-1-5, Г-Ц / b⁺-IVS-1-110, Г-А. Учитывая репродуктивный возраст супругов, в ближайшей перспективе планируется проведение в первом триместре беременности (10-12 недель) пренатальную диагностику талассемии у плода. В Сальянском регионе идентифицировано три типа мутации b-талассемии: замена нуклеотида гуанин на аденин в первом интроне 110-го кодона глобинового гена - IVS-1-110 (Г-A); замена нуклеотида гуанин на аденин в первом кодоне второго интрона глобинового гена - IVS-2-1, (Г-A) и микроделеция двух нуклеотидов аденин глобинового гена - кодон 8 (-AA). В Джалилабадском районе для трех гомозигот по β-талассемии идентифицировано два типа мутации: замена нуклеотида гуанин на аденин в 110 позиции первого интрона β- глобинового гена (β-IVS-1-110, Г-A) и микроделеция двух нуклеотидов аденин восьмого кодона первого экзона β- глобинового гена (β-кодон 8 -АА). Среди населения Кобустанского и Ахсуинского регионов Ширванской зоны у трех больных с диагнозом большая талассемия идентифицировано два типа мутации β-глобинового гена (β-ГГ): замена нуклеотида аденин на нуклеотид гуанин в 110 позиции первого интрона β-ГГ (β-IVS-1-110, А-Г) и делеция двух нуклеотидов аденин в 8-ом кодоне первого экзона β-ГГ (β-кодон 8 -АА). Соотношение аллелей β-IVS-1-110, А-Г и β-кодон 8 -АА составило 4/2.

Изученные патологии информативны для организации быстрого мониторинга популяций, необходимого для исследования структуры общего генофонда, генного разнообразия популяций и составления регистра патологий, использующегося для квалифицированного медико-генетического консультирования семей с проведением пренатальной диагностики заболеваний.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Демикова Н.С. Система мониторинга врожденных пороков развития в Российской Федерации. http://expo.medi.ru/%20cmz03-tezis-detstvo.htm
2. Демикова Н.С., Козлова С.И. Мониторинг врожденных пороков развития. // Вестник РАМН. 1999. 11. С. 29.
3. Кобринский Б.А., Демикова Н.С. Принципы организации мониторинга врожденных пороков развития и его реализация в Российской Федерации. // Российский вестник педиатрии и перинатологии, 2001. Т. 46. №4. С. 55.
4. Ли Ч. Введение в популяционную генетику. М.: Мир, 1978, 546 с.
5. Новиков П.В. Основные направления профилактики, ранней диагностики и лечения врожденных и наследственных болезней у детей. http://expo.medi.ru/cmz03-tezis-detstvo.htm
6. Пузырев В.П., Эрдыниева Л.С., Кучер А.Н., Назаренко Л.П. Генетико-эпидемиологическое исследование населения Тувы. - Томск: STT, 1999. 256 с.
7. Шостакович-Корецкая Л.Р., Маврутенков В.В., Братусь Е.В., Маврутенкова Т.В. Полимеразно-цепная реакция: принципы и практические рекомендации по использованию в клинической практике врача (руководство для врачей). / Днепропетровск: МЗ Украины, 2002. 26 с.
8. Modell B. The ethics of prenatal diagnosis and genetic counseling. // World Health Forum. 1990. 11. P.179.
9. Morengo-Rowe A.J. Rapid electroforesis on cellulose acetate. // J. Clin. Pathology. 1965. 18. P. 790.
10. Rasulov E. Express-methods of hemoglobinopathy dignosis in newborns. // Journal of molecular genetics, microbiology, virusology. 1990. 1. P. 27.
11. Saiki R. K., Scharf S., Faloona F., Mullis K. B., Horn G. T., Erlich H. A., Arnheim N. Enzymatic amplification of beta-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia. // Science. 1985. 230. P. 1350.