Целью работы было изучение влияния липидов, полученных от интактных животных и животных с эндотоксемией (ЭТ), на активность ряда ферментов в экспериментах in vitro.
Для исследования были использованы экстракты, полученные из плазмы венозной крови 9 интактных морских свинок и от 9 животных спустя 12 ч после введения внутрибрюшинного введения 2 мг/кг массы липополисахарида S. thyphi (LPS Sigma, USA). В плазме крови интактных морских свинок содержалось 2,73+0,13 г/л липидов, к 12 ч ЭТ 3,14+0,10 г/л липидов. Приготовление суспензии липидов включало в себя лиофилизацию экстракта и ресуспензирование в изотоническом растворе хлорида натрия, объем которого соответствовал первоначальному объему плазмы. По 0,1 мл суспензии липидов смешивали с 0,9 мл контрольной плазмы, инкубировали при 37 оС в течение 1 мин и использовали в опыте. Системы готовили таким образом, чтобы содержание фермента в конечном растворе было одинаковым в контроле и при добавлении липидов. Конечные концентрации липидов составляли 10-4 -10-7 М.
В исследованных системах активность трипсина при прибавлении липидов, полученных от животных с ЭТ, существенно не изменялась, активность щелочной фосфатазы, глутатионпериоксидазы и плазмина дозозависимо возрастала. Активность глутатионтрансферазы при использовании высоких концентраций липидов (10-4-10-5 М) ингибировалась, а при добавлении низких концентраций (10-5 М), напротив, несколько увеличивалась. Подобный характер действия наблюдался и при тестировании пероксидазы при использовании липидов в конечных концентрациях 10-4 -10-5 М активность дозозависимо возрастала, при низких концентрациях уменьшалась. Ни одна ферментативная система не изменяла своей биологической активности при введении липидов в концентрациях 10-7 М.
Проведенные исследования in vitro свидетельствуют о том, что липиды, находящиеся в крови животных с ЭТ, способны оказывать влияние на различные ферментативные системы, в том числе связанные с системами детоксикации и антиоксидантами. Их биологические эффекты зависят от концентрации липидов и в некоторых случаях при их повышении способны изменяться на противоположные.