Одной из актуальных проблем медицинской и биологической науки является поиск новых источников лекарственного растительного сырья, способных расширить сырьевую базу и обновить ассортимент лекарственных и профилактических средств растительного происхождения. На сегодняшний день в фитотерапии – научной и народной медицине, гомеопатии и ветеринарии используется около двух тысяч видов растений [1]. При этом следует отметить, что биоразнообразие лекарственных растений используется человеком далеко не полностью в связи с отсутствием данных о ресурсах, недостатком сведений о составе биологически активных веществах (БАВ) в объектах, обладающих активностью и малой изученностью фармакологических свойств их препаратов. Лекарственные растения содержат витамины, полифенольные соединения, микроэлементы, фитонциды, камеди, слизи, аминокислоты, ферменты, пектины и другие соединения, стимулирующие процессы метаболизма, повышающие иммунитет и сопротивляемость организма к инфекциям, способствующие элиминации токсичных соединений [1, 2, 3, 4].
Повсеместное распространение многих лекарственных растений, значительная дешевизна полученных из них препаратов и высокая физиологическая активность комплекса биологически активных (действующих) веществ – все это должно привлечь внимание исследователей.
Все вышеизложенные факторы послужили причиной для настоящего исследования.
Цель исследования. Целью представленной работы явилось изучение перспективных источников природных биологически активных веществ в Предуралье.
Для достижения поставленной цели необходимо выявлять перспективные виды, изучать их распространение, проводить исследования химического состава растительного сырья и фармакологических свойств препаратов из него.
Материалы и методы исследования
Материалы для исследований были собраны нами в лесостепной и степной зонах Предуралья, включающих Кунгурско-Красноуфимскую лесостепь Среднего Предуралья и Южное Предуралье – районы Башкортостана и Оренбургское Предуралье.
Исследуя флору Предуралья в период экспедиций (1970-1988 гг. и 1990-2010 гг.), мы особо обратили особое внимание на растения рода Veronica L., семейства Норичниковых – Scrophulariaceae Juss., которые широко применяются в фитотерапии нашей страны и ряда стран Западной Европы и Центральной Азии [1, 3, 5, 6, 7, 8, 9].
Препараты из растений рода Veronica L. обладают противовоспалительным, отхаркивающим, седативным, кровоостанавливающим, антитоксическим и ранозаживляющим действием [1, 6, 7, 8]. Некоторые виды рода Veronica L. обладают противораковым действием. К таким видам относятся Veronica chamaedrys L. и V. officinalis L., применяемые при раке желудка и кишечника [5]. Вероника лекарственная – Veronica officinalis L., кроме того, включена в состав многих сборов, лечебных чаев и биологически активных пищевых добавок [1, 3].
Вероника лекарственная – Veronica officinalis L. (рис.1) – многолетнее травянистое растение, мезофит, с ползучим и укореняющимся в верхней части восходящими стеблями высотой до 35 см и обратно-яйцевидными или продолговатыми листьями. В Предуралье растет в разреженных хвойных и смешанных лесах, иногда в хвойно-широколиственных лесах, на лесных полянах и опушках.
Исторические сведения о V. officinalis L. приводятся немецкими исследователями [7], которые указывают на применение растения в период Средневековья при заболеваниях желудка, печени, легких, селезенки, почек, матки, при головокружении, слабой памяти и кожных болезнях.
В России V. officinalis применяли для лечения простудных заболеваний, болезни мочевого пузыря, от нарывов и как ранозаживляющее средство [1], от боли в спине и пояснице [9]. V. officinalis до 1880 года была включена в отечественную фармакопею, и до 1910 года в немецкую фармакопею [1, 7]. Трава V. officinalis L. официнальна в медицине ряда стран Западной Европы [7].
Препараты травы V. officinalis L. обладают противовоспалительным, обезболивающим, противосудорожным, антисептическим, кровоостанавливающим и ранозаживляющим действием [1, 6]. В странах Европы масляные экстракты из травы применяют для лечения гнойных ран, фурункулов и ожогов [7, 9]. В ветеринарии настой и напар используют для лечения кожных болезней у животных, для улучшения аппетита, как вяжущее и кровоостанавливающее средство, а свежую траву вероники лекарственной добавляют к зеленому корму в качестве витаминного средства [8]. На пастбище вероника лекарственная скотом не поедается, а в сене поедается удовлетворительно.
Вероника дубравная – Veronica chamaedrys L. (рис. 2) – многолетнее травянистое растение, мезофит, до 45 см высотой, с округло-яйцевидными листьями и светло-синими цветками, расположенными в супротивных кистях. В Предуралье растет на лугах, опушках, разреженных лесах, в луговых степях. Траву V. chamaedrys L. издавна применяют в народной медицине нашей страны при различных заболеваниях в виде припарок и настоек для заживления груди у женщин при кормлении детей и при маститах [6, 9], при простудных заболеваниях «от судорожных припадков» в груди, от одышке, при зубной и головной боли, «от лома в костях», при туберкулезе легких, от грыжи, золотухи, «волнении крови» и «укушениях змеею» [6], а также от нарывов [1]. В прошлом V. chamaedrys L. в ветеринарной практике при кожных болезнях [3]. В народной медицине V. chamaedrys L. используется наравне с V. officinalis L. как противовоспалительное при простудных заболеваниях, кожных сыпях, фурункулезах и как диуретическое средство [6].
Рис. 1. Veronica officinalis L.
Рис. 2 .Veronica chamaedrys L.
Для оценки качества лекарственного растительного сырья вероник нами были проведены исследования комплекса биологически активных веществ (БАВ) в сырье V. officinalis L. и V. chamaedrys L., используя методы определяющие качество лекарственного растительного сырья [2, 10, 15]. Исследованию на содержание БАВ подвергались отдельные органы и вся надземная часть (трава), собранная в период цветения в типичных местообитаниях лесостепного и степного Предуралья.
Результаты исследования и их обсуждение
Изучаемые нами растения не являются алкалоидоносами и многие из них содержат другие азотсодержащие вещества основного характера, в частности, амины и их производные, которые при общих реакциях на алкалоиды ведут себя подобно последним [2]. В результате исследований установлено, что в исследуемых извлечениях из листьев и травы V. officinalis L. и V. chamaedrys L. присутствуют азотсодержащие вещества (табл. 1).
Далее растительное сырье исследовали на наличие веществ гликозидной природы. Наиболее характерная реакция на наличие гликозидов и высокое их содержание отмечено в извлечениях из листьев V. officinalis. Менее характерная реакция на гликозиды отмечена в извлечениях из листьев и соцветий V. chamaedrys L. (табл. 2).
Таблица 1
Результаты исследования сырья V. officinalis L. и V. chamaedrys L. Предуралья на присутствие азотсодержащих веществ
Название растений |
Исследуемая часть |
Оценка содержания алкалоидов |
||||||||
Реактив Бушарда |
Реактив Вагнера |
Реактив Майера |
Реактив Драгендорфа |
Р-р танина |
Реактив Зонненштейна |
Реактив Бертрана |
Суммированные литературные данные |
Результаты исследований |
||
Вероника лекарственная (Veronica officinalis L.) |
трава листья стебли соцветия |
++ + Сл. + |
+ ++ О Сл. |
Сл. Сл. О О |
+ + Сл. + |
++ ++ Сл. Сл. |
+++ +++ + + |
++ + Сл. + |
Сл. + – – |
++ ++ Сл. + |
В. дубравная (V. chamaedrys L.) |
трава листья стебли соцветия |
+ + Сл. Сл. |
+ ++ О Сл. |
Сл. Сл. О О |
Сл. Сл. О Сл. |
+ + Сл. + |
++ +++ + + |
+ ++ Сл. Сл. |
+ + + – |
+ ++ Сл. Сл. |
Обозначения:
– – отсутствие сведений; О – отсутствие веществ, вытяжка от прибавления реактива осталась прозрачной; сл – следы, отмечено появление опалесценции; + – небольшой осадок от первых двух капель реактива; ++ – осадок, появляющийся от прибавления одной капли реактива; +++ – обильный осадок, появляющийся от прибавления одной капли реактива (очень четкая реакция).
Таблица 2
Результаты исследования сырья V. officinalis L. и V. chamaedrys L. Предуралья на содержание гликозидов
Название растений |
Исследуемая часть |
Гликозиды |
Сердечные гликозиды |
||
Результаты исследования |
Лит. данные |
Результаты исследования |
Лит. данные |
||
Вероника лекарственная (Veronica officinalis L.) |
трава листья стебли соцветия |
+ ++ О + |
– – – – |
Сл. + О Сл. |
– – – – |
В. дубравная (V. chamaedrys L.) |
трава листья стебли соцветия |
О + О + |
– – – – |
О Сл. О О |
– – – – |
Обозначения:
– – отсутствие сведений; О – отсутствие веществ (отрицательная реакция); сл – следы, едва заметная реакция; + – наличие, заметная реакция; ++ – значительное количество, выраженная реакция; +++ – высокое содержание, ярко выраженная реакция.
Наличие флавоноидов определялось нами в сырье растений, собранных в период цветения. Фитохимические исследования позволили установить присутствие флавоноидов группы флавона во всех органах исследуемых растений. Методом полуколичественного определения флавоноидов установлено, что максимальное их количество накапливается в листьях и соцветиях V. officinalis (табл. 3).
Наиболее характерные реакции на присутствие кумаринов отмечены в соцветиях V. officinalis (табл. 3).
Таблица 3
Результаты фитохимического исследования растений V. officinalis L. и V. chamaedrys L. лесостепного и степного Предуралья на различные группы биологически активных веществ
Название растений |
Исследуемая часть |
Флавоноиды |
Кумарины |
Лактоны |
Таниды |
Иридоиды |
|||||
Результаты исследования |
Лит. данные |
Результаты исследования |
Лит. данные |
Результаты исследования |
Лит. данные |
Результаты исследования |
Лит. данные |
Результаты исследования |
Лит. данные |
||
Вероника лекарственная (Veronica officinalis L.) |
Трава Листья Стебли Соцветия |
+++ +++ + ++ |
+ – – – |
++ Сл. О ++ |
+ – – – |
+ + О + |
+ – – – |
+ ++ О Сл. |
+ – – – |
++ +++ + + |
+ – – – |
Вероника дубравная (Veronica chamaedrys L.) |
Трава Листья Стебли Соцветия |
++ ++ Сл. ++ |
+ + – – |
– О О + |
++ – – |
+ + О О |
– – – – |
+ + О О |
– – – – |
++ ++ Сл. + |
+ + – – |
Обозначения: см. табл.2.
Определение лактонов проводили с извлечением, приготовленным для обнаружения производных кумарина. В исследуемых растениях лактоны обнаружены в незначительном количестве, в основном в виде следов (табл. 3).
Наиболее характерные реакции на дубильные (окисляемые) вещества отмечены в извлечениях из сырья V. officinalis (табл. 3). В сырье V. chamaedrys L. таниды обнаружены в незначительном количестве.
Наиболее характерные реакции на иридоиды отмечены в извлечениях из листьев и травы V. Officinalis (табл. 3). В несколько меньшем количестве, судя по интенсивности окрашивания извлечений, иридоиды содержат растения V. chamaedrys.
На следующем этапе исследований нами была предпринята попытка провести идентификацию основных индивидуальных соединений в составе комплекса биологически активных веществ.
Изучение качественного состава азотистых веществ в траве V. officinalis и V. chamaedrys проводили методом восходящей хроматографии на бумаге [2, 4]. Установлено, что алкалоидоносность V. officinalis и V. chamaedrys обусловлена присутствием азотистых веществ основного характера, в частности аминоспирта – холина:
Холин (2-оксиэтил-триметилааммоний), относящийся к витаминам группы В, является биологически активным веществом из которого в организме синтезируются фосфатидилхолины (лецитины) и сфингомиэлины [1], метионин, а также нейромедиатор ацетилхолин. Препараты, содержащие холин, широко применяют для лечения и профилактики заболеваний печени и атеросклероза. В литературе отмечается влияние препаратов холина на память, регуляция уровня инсулина в крови [4, 7].
Оценка качественного состава полифенольного комплекса в траве V. officinalis и V. chamaedrys проводилась с применением метода двумерной бумажной хроматографии в системах БУВ 4 : 1 : 5 (система 1) и 15 % уксусной кислоте (система 2). После детектирования хроматограмм в извлечении из сырья V. officinalis обнаружено 12 флавоноидов и 8 фенолкарбоновых кислот, а в извлечениях из сырья V. chamaedrys – 10 флавоноидов и 8 фенолкарбоновых кислот.
При хроматографировании со свидетелями удалось идентифицировать ряд соединений полифенольной природы (табл. 4).
Таблица 4
Наличие основных флавоноидов в траве V. officinalis и V. chamaedrys L.
лесостепного и степного Предуралья
Группа полифенольных соединений |
Название индивидуального соединения |
V. officinalis |
V. chamaedrys |
1. Флавоноиды |
Цинарозид |
+++ |
++ |
Апигенин-7- глюкуронид |
++ |
+ |
|
Лютеолин |
+++ |
+++ |
|
Апигенин |
++ |
– |
|
2. Фенолкарбоновые кислоты |
Кофейная |
+++ |
++ |
Хлорогеновая |
+++ |
+ |
|
Неохлорогеновая |
+ |
+ |
|
Феруловая |
++ |
+ |
|
Хинная |
+ |
– |
|
Шикимовая |
– |
++ |
Лютеолин-7-глюкозид(5, 7, 3’, 4’-тетраоксифлавон) |
Апигенин (5, 7, 4’-триоксифлавон) |
Цинарозид (лютеолин7-0-β-D-глюкопиранозид) |
Шикимовая кислота |
Кофейная кислота |
Феруловая кислота |
Хинная кислота |
Хлорогеновая кислота |
Заключение
В результате фитохимического исследования надземной части Veronica officinalis L. и V. chamaedrys L., произрастающих в районах лесостепного и степного Предуралья нами установлено следующее:
- наиболее характерными соединениями в изучаемых видах являются флавоноиды группы флавона и иридоиды группы аукубина;
- в надземных органах исследуемых видов Veronica L. обнаружены: азотсодержащие вещества, дубильные (окисляемые) вещества, в незначительном количестве сердечные гликозиды и кумарины;
- полифенольный комплекс в надземных органах исследуемых растений представлен многобразием флавоноидов (до 12 соединений) и фенолкарбоновых кислот (до 8 веществ);
- в исследуемых растениях обнаружены и идентифицированы флавоноиды (цинарозид, апигенин, апигенин-7- глюкуронид, лютеолин), фенолкарбоновые кислоты (кофейная, хлорогеновая, неохлорогеновая, феруловая, хинная, шикимовая), холин;
- фитохимический состав надземных органов V. officinalis L. и V. chamaedrys L. И их широкое распространение в Волго-Уральском регионе позволяет считать указанные виды перспективными источниками природных биологически активных веществ.