За последние 30лет доля сердечно-сосудистых заболеваний вструктуре смертности населения России превышает 50 % всех случаев смерти, аведущее место среди данной патологии принадлежит артериальной гипертонии [3].
Артериальная гипертензия как патологическое состояние сопровождается увеличением сердечного выброса иповышением периферического сопротивления. Это включает вазоконстрикцию вответ на давление инейрогуморальную стимуляцию споследующим структурным уменьшением просвета сосудов вследствие утолщения их медиального слоя– ремоделирование, кроме этого претерпевает изменение цитоархитектоника клеточной мембраны клеток крови, впервую очередь это относится кэритроцитам [1, 2].
Цель исследования– установление нарушений состояния мембраны красных клеток крови упациентов сгипертонической болезнью взависимости от стадии заболевания.
Материалы иметоды. В работе представлены данные обследования илечения на базе ОБУЗ «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи» г. Курска 97пациентов сверифицированным, согласно рекомендациям ВОЗ/МОГ (1999), диагнозом гипертоническая болезнь I, II, III стадий, основанном на данных комплекса клинико-инструментальных методов обследования. Ведущим критерием включения висследование больных ЭАГ было наличие уних стойкой ночной гипертензии и«non-dipper» типа суточной кривой по результатам двойного СМАД для исключения влияния случайных факторов на профиль АД. Все больные находились на безнит-ратной диете.
Группу контроля составили 28здоровых доноров (11женщин и17мужчин), средний возраст которых составил 35,2±2,1лет. Критерии включения пациентов висследование: мужчины иженщины ввозрасте 30-60лет; артериальная гипертензия I, II или III стадии санамнезом заболевания более 3лет.
Электрофорез мембранных белков эритроцитов проводили вприсутствии додецилсульфата натрия ввертикальных пластинах полиакриламидного геля, кроме этого определяли сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) исорбционную емкость их гликокаликса (СЕГ)[7, 8].
Эритроциты отмывали по методике E.Beutler [9], амембраны эритроцитов получали методом G.T.Dodge [10]. Электрофорез проводили вприсутствии додецилсульфата натрия ввертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K.Laemmli [12]. Белки окрашивали Кумаси голубым R-250по модифицированной методике G.Fairbanks [111].
Все пациенты получали стандартную фармакотерапию: сI стадией гипертонической болезни монотерапию лизиноприлом, со II стадией– дополнительно гипохлортиазид, сIII стадией получали помимо лизиноприла, гипохлортиазида еще иамлодипин. Тогда как 49пациентов дополнительно кстандартной фармакотерапии получали милдронат (750мг/сут в/в до 10дней затем внутрь до 8недель).
Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя параметрические инепараметрические методы [4].
Результаты. У пациентов сгипертонической болезнью Iст. вмембране красных клеток крови снижен уровень подфракций спектрина, анкирина иповышен уровень белка полосы 4.1идематина, что привело кснижению уданной категории пациентов СЕГ иССЭ (табл. 1).
Таблица 1
Представительность белков исорбционные свойств мембраны эритроцитов убольных гипертонической болезнью (М±m)
|
Показатели |
Здоровые доноры |
Гипертоническая болезнь |
||
|
I стадия |
II стадия |
III стадия |
||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
|
|
α-спектрин |
114,3±8,8 |
98,2±4,7*1 |
101,1±5,1*1 |
76,2±3,91*1-3 |
|
β-спектрин |
106,6±7,6 |
91,8±3,81*1 |
75,3±4,72*1,2 |
65,7±2,19*1-3 |
|
Анкирин |
113,3±8,2 |
62,6±4,5*1 |
70,2±5,82*1 |
39,5±2,81*1-3 |
|
Анионтранспортный белок |
189,6±6,4 |
188,6±9,31 |
239,6±17,8*1,2 |
226,2±10,5*1,2 |
|
Белок полосы 4.1 |
43,3±4,1 |
74,2±3,34*1 |
53,2±3,82*1,2 |
92,1±8,4*1-3 |
|
Паллидин |
56,6±3,1 |
61,4±3,73 |
46,5±2,14*1,2 |
77,1±4,3*1-3 |
|
Белок полосы 4.5 |
98,2±7,5 |
89,2±7,7 |
126,6±9,05*1,2 |
78,9±6,35*1-3 |
|
Дематин |
20,1±2,1 |
36,8±2,82*1 |
22,1±1,87*2 |
50,1±4,8*1-3 |
|
Актин |
102,1±8,9 |
108,1±7,41 |
110,3±8,26 |
136,2±11,7*1-3 |
|
Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа |
37,8±2,6 |
39,8±2,81 |
21,2±1,93*1,2 |
42,4±4,81*3 |
|
Тропомиозин |
68,8±4,6 |
63,7±3,06 |
69,5±4,2 |
75,1±5,03*2 |
|
Глутатион-S-трансфераза |
49,3±4,1 |
55,5±3,02 |
46,3±3,82*2 |
58,9±4,51*1,3 |
|
СЕГ |
1,42±0,1 |
1,13±0,12*1 |
1,29±0,08*1,2 |
1,25±0,09*1,2 |
|
ССЭ |
32,8±1,2 |
22,1±2,41*1 |
21,3±1,13*1 |
20,2±1,72*1 |
Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (p<0,05); цифры рядом со звездочкой– по отношению кпоказателям какой группы эти различия.
У больных сгипертонической болезнью II ст. вэритроцитарной мембране, по сравнению спредыдущей группой больных, вбольшей стадии снижена представительность β-спектрина, дополнительно возрастает уровень анионтранспортного белка, белка полосы 4.5иснижается представительность паллидина иглицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (табл. 1).
У пациентов сIII ст. гипертонической болезни резко снижен уровень вмембране эритроцитов подфракций анкирина, спектрина, белка полосы 4.5иповышен уровень белка полосы 4.1, актина идематина (табл. 1).
Нами был определен уровень нейтральных липидов ифосфолипидов вмембране красных клеток крови. Так, при Iст. гипертонической болезни возрастает уровень лизофосфатидилхолина, сфингимиелина, фосфатидилинозитола ихолестрина иснижается представительность триглицеридов, эфиров холестерина ифосфатидилхолина, тогда как убольных сII ст. дополнительно повышен уровень моно- идиглицеридов иснижена представительность фосфатидилинозитола (табл. 2).
Таблица 2
Представительность липидов вмембране эритроцитов убольных гипертонической болезнью (М±m)
|
Показатели |
Здоровые доноры |
Гипертоническая болезнь |
||
|
I стадия |
II стадия |
III стадия |
||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
|
|
Лизофосфатидилхолин |
5,38±0,17 |
6,4±0,11*1 |
7,7±0,23*1,2 |
10,1±0,48*1-3 |
|
Сфингомиелин |
11,02±0,52 |
14,1±0,61*1 |
11,2±0,41*2 |
9,9±0,22*1-3 |
|
Фосфатидилинозитол |
19,7±0,69 |
22,1±0,51*1 |
23,6±1,22*1 |
17,4±1,1*1-3 |
|
Фосфатидилхолин |
23,01±0,71 |
19,4±0,68*1 |
18,8±0,91*1 |
17,6±0,77*1,2 |
|
Фосфатидилэтаноламин |
23,45±0,97 |
23,3±1,24 |
19,6±0,43*1,2 |
20,0±0,87*1,2 |
|
Холестерин |
47,79±1,38 |
54,2±2,17*1 |
54,9±2,0*1 |
59,7±2,33*1-3 |
|
Моно идиглицериды |
9,55±0,49 |
10,2±0,31 |
11,5±0,48*1,2 |
11,5±0,52*1,2 |
|
Свободные жирные кислоты |
2,98±0,17 |
3,0±0,13 |
3,4±0,31 |
3,2±0,11 |
|
Триглицериды |
14,48±0,67 |
12,7±0,81*1 |
14,8±1,2*2 |
12,4±1,33*1,3 |
|
Эфиры холестерина |
46,19±1,62 |
34,6±2,4*1 |
34,6±3,3*1 |
31,2±2,88*1 |
Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (p<0,05); цифры рядом со звездочкой– по отношению кпоказателям какой группы эти различия.
У больных гипертонической болезнью III ст. вэритроцитарной мембране выраженность изменений представительности липидов максимальна: вбольшей степени возросла представительность лизофосфатидилхолина ихолестерина иснизился уровень сфингимиелинга ифосфатидилхолина (табл. 2).
Обсуждение
Таким образом, исходя из функций интегральных ипериферических белков мембраны эритроцитов, можно заключить, что выявленные изменения убольных гипертонической болезнью направлены на уменьшение прочности идеформируемости эритроцитарной мембраны (снижение уровня анкирина, спектрина), снижение общей сорбционной способности эритроцитов иих гликокаликса иповышение их метаболической активности (повышение уровня анионтранспортного белка), что ускоряет процессы старения красных клеток крови, тогда как упациентов сгипертонической болезнью III ст. данные изменения более выражены [1, 3].
У больных гипертонической болезнью вмембране эритроцитов выявлены различные изменения влипидном спектре, что всвою очередь сказывается ина организации мембраны вцелом. Так, повышенный уровень холестерина уменьшает подвижность жирных кислот, снижает латеральную диффузию липидов ибелков, изменяет функцию последних, снижение сфингомиелина при III cтадии обуславливает снижение микровязкости липидной фазы мембраны, тогда как низкий уровень фосфатидилхолина снижает проницаемость мембраны иуменьшает метаболизм холестерина [3, 6].
Поэтому очевидна необходимость коррекции убольных гипертонической болезнью нарушений структурно-функциональных свойств красных клеток крови, которые могут быть достигнуты использованием препаратов, обладающих антиоксидантной активностью.