Во второй половине прошлого столетия было показано, что нейроэндокринная регулирующая система тесно сотрудничает симмунной системой впроцессах регуляции гомеостатических функций. Наличие рецепторов кнейромедиаторам (гистамину, катехоламинам, серотонину, ацетилхолину) на лимфоидных клетках доказывает подчиненность иммунной системы нейрогуморальному воздействию [1]. Вчастности, гормон поджелудочной железы инсулин способен изменять содержание биогенных аминов влимфатических узлах, тимусе, селезенке [4]. Есть данные онаправленности изменения уровня гистамина (Г) вструктурах лимфатических узлов под действием этого гормона [2]. Однако влияние инсулина на содержание катехоламинов (КА), корреляционные связи между биоаминсодержащими структурами недостаточно изучены.
Всвязи сэтим мы считаем необходимым дать характеристику обеспеченности структур лимфатических узлов катехоламинами внорме ипри введении инсулина.
Нами были поставлены следующие задачи: 1)определить количественное содержание КА вбиоаминсодержащих структурах брыжеечных лимфатических узлов; 2) изучить корреляционные связи между катехоламинсодержащими структурами; 3)изучить уровень корреляции между биоаминами впаре КА-серотонин (СТ) ив паре КА-гистамин.
Методы исследования. Исследования проведены на 22белых беспородных мышах-самцах массой 40-50г. Эксперимент заключался во введении животным препарата «Актрапид»– человеческого, генно-инженерного инсулина короткого действия. Животные при этом были разделены на 2группы: интактные (10) иподопытные (12), которым внутримышечно вводили 75ЕД препарата. Материал для исследования (брыжеечные лимфатические узлы) забирали на 3-и, 7-е и14-е сутки введения препарата. Интактные мыши служили контролем.
Для выявления моноаминсодержащих структур (С иКА) пользовались люминесцентно-гистохимическим методом Фалька-Хилларпа вмодификации Е.М.Крохиной (Крохина Е.М., АлександровП.Н.,1969); методом Кросса, Эвена, Роста(Cross, Ewen, Rost, 1971) определяли гистаминсодержащие структуры. Цитоспектрофлуориметрией определяли количественное содержание катехоламинов спомощью люминесцентного микроскопа ЛЮМАМ-4сдополнительной насадкой ФМЕЛ-1А. Показания снимали стабло усилителя вусловных единицах (у.е.) Полученные цифровые данные обрабатывали статистически сиспользованием табличного редактора Excel из пакета прикладных программ Microsoft Office 2003.Корреляционный анализ проводили для установления корреляционных взаимосвязей между биоаминами вкаждой структуре лимфатического узла.
Собственные результаты иобсуждение. Содержание КА после введения инсулина изменяется следующим образом (табл. 1): во внутрифолликулярных клетках увеличивается на всех сроках введения инсулина по сравнении сконтрольным значением. Это можно рассматривать как активацию их пролиферации, так как КА стимулирующе действуют на иммунные процессы. Вбереговых клетках уровень КА подвержен волнообразным колебаниям. Вмикроокружении береговых клеток, впаракортикальных клетках имикроокружении паракортикальных клеток содержание КА на всех сроках эксперимента ниже, чем уинтактных животных.
Исследование корреляционных взаимосвязей между КА-содержащими структурами брыжеечных лимфатических узлов (табл. 2) показывает высокий уровень корреляции во всех исследуемых структурах на 14-е сутки введения препарата. Это свидетельствует осогласованном одновременном получении катехоламинов обоими членами пары [3].
Таблица 1
Уровень КА вструктурах лимфатического узла внорме ипри введении инсулина
|
контроль |
3дня |
7дней |
14дней |
|
|
Внутрифолликулярные клетки |
3,74±0,02 |
7,6±0,17 |
6,49±0,05 |
7,09±0,05 |
|
Микроокружение внутрифолликулярных клеток |
2,7±0,03 |
2,45±0,27 |
1,94±0,02 |
5,71±0,07 |
|
Береговые клетки |
5,52±0,04 |
6,3±0,11 |
2,6±0,03 |
7,34±0,06 |
|
Микроокружение береговых клеток |
3,26±0,03 |
2,83±0,02 |
2,04±0,02 |
1,85±0,02 |
|
Паракортикальные клетки |
6,06±0,05 |
3,49±0,04 |
1,38±0,02 |
3,87±0,04 |
|
Микроокружение паракортикальных клеток |
6,31±0,03 |
1,17±0,02 |
1,33±0,03 |
2,56±0,06 |
Таблица 2
Коэффициент корреляции между КА-содержащими структурами лимфатического узла внорме ипри введении инсулина
|
норма |
3дня |
7дней |
14дней |
|
|
Внутрифолликулярные клетки иих микроокружение |
0,19 |
0,23 |
0,04 |
0,85* |
|
Береговые клетки иих микроокружение |
-0,13 |
0,39 |
-0,43 |
0,62* |
|
Паракортикальные клетки иих микроокружение |
-0,52 |
0,36 |
-0,44 |
0,55* |
При изучении коэффициента корреляции между биоаминами впаре СТ-КА (табл. 3) уконтрольных животных прослеживается средний уровень корреляционной связи во внутрифолликулярных клетках. На 3-и сутки проведения эксперимента сильная корреляционная связь наблюдается вбереговых клетках. Это говорит отом, что эти два биоамина действуют однонаправленно. На 14-е сутки уровень корреляционной связи вбереговых клетках принимает высокое отрицательное значение, то есть происходит трансформация корреляционной связи впаре СТ-КА. Сильная отрицательная корреляция может указывать на истощение структур или на их антагонистическое отношение друг кдругу.
Таблица 3
Коэффициент корреляции между биоаминами впаре катехоламины-серотонин вструктурах лимфатического узла уинтактных животных ипри введении инсулина
|
норма |
3дня |
7дней |
14дней |
|
|
Внутрифолликулярные клетки |
-0,56* |
0,28 |
0,47 |
0,21 |
|
Береговые клетки |
0,36 |
0,68* |
-0,33 |
-0,63* |
|
Паракортикальные клетки |
-0,26 |
0,50 |
-0,33 |
0,17 |
|
*– достоверность P<0,05 |
||||
Впаре КА-Г (табл. 4) высокая корреляционная связь на 3-и и14-е сутки введения препарата вбереговых клетках. Высокий уровень корреляции может указывать на одновременное повышение каждого биоамина вкорреляционной паре.
Таблица 4
Коэффициент корреляции между биоаминами впаре катехоламины-гистамин вструктурах лимфатического узла уинтактных животных ипри введении инсулина
|
норма |
3дня |
7дней |
14дней |
|
|
Внутрифолликулярные клетки |
-0,42 |
0,22 |
-0,47 |
-0,41 |
|
Береговые клетки |
-0,16 |
0,98* |
-0,07 |
0,65* |
|
Паракортикальные клетки |
-0,40 |
-0,01 |
0,26 |
0,19 |
На основе полученных результатов можно сделать следующие выводы:
1)при введении инсулина изменяется уровень КА вструктурах лимфатического узла;
2)под действием гормона коэффициент корреляции между КА-содержащими структурами принимает высокие положительные значения на 14-е сутки эксперимента;
3)введение инсулина приводит кизменению корреляционных связей между биоаминными парами вструктурах лимфатического узла.