Повышение устойчивости растений к болезням может быть достигнуто химическим методом с помощью различных веществ – химических иммунизаторов – соединений, которые могут проникать в растения, ассимилироваться ими, оказывать влияние на обмен веществ, повышая тем самым устойчивость к паразиту. Химическую иммунизацию могут вызывать фунгициды, рострегулирующие вещества, антибиотики, макро- и микроэлементы [2]. Фунгициды комплексно-иммунизирующего действия или продукты их декомпозиции изменяют метаболизм растений в сторону повышения устойчивости к заболеваниям не только в год обработки, но и в последующих поколениях [6], что дает основание отнести это явление к типу приобретенного иммунитета.
Среди различных приемов, позволяющих защитить картофель от болезней, наиболее экономичным и экологически безопасным является протравливание клубней. Основной идеей создания протравителей явилось присутствие пропагативных структур возбудителей болезней на поверхности семенного материала, а также внутри него. Ежегодная высокая инфицированность семенных клубней [5] обуславливает необходимость обязательного предпосадочного протравливания клубней. Протравливание обеспечивает максимальный эффект при минимально отрицательном влиянии на компоненты агроценоза [12]. Для прямого подавления и уничтожения патогенов в основном используются химические препараты контактного и системного действия, которые снижают жизнеспособность либо вызывают гибель возбудителя, прерывая его инфекционный цикл. Этим достигается уничтожение инфекции на клубнях и их защита от возбудителей почвенно-клубневых инфекций, как во время хранения, так и во время прорастания. Данный прием в определённой мере также препятствует поражению клубней нового урожая.
Однако пестициды требуют пристального внимания и изучения из-за их токсического воздействия на окружающую среду. Одним из путей повышения безопасности данного метода является совершенствование ассортимента пестицидов, направленное на улучшение их санитарно-гигиенических и экологических характеристик, высокую эффективность в сочетании с малой опасностью для теплокровных животных и окружающей среды [4].
Целью настоящей работы является синтез и изучение биологической эффективности полифункциональных комплексных препаратов-протравителей на основе карбендазима (БМК), полученных его механохимической модификацией с помощью водорастворимых полимеров.
Материалы и методы исследования
Карбендазим (БМК)- [N-(Бензимидазолил-2)-О-метилкарбамат] – действующее вещество (ДВ) пестицидов из класса бензимидазолов, один из первых системных фунгицидов, который используется и в настоящее время [7]. БМК представляет собой кристаллическое вещество от серого или голубого до темно-коричневого цвета. Плохо растворим в воде и многих органических растворителях, растворим в кислотах. Для изменения растворимости БМК применяли следующие водорастворимые полимеры:
– арабиногалактан (АГ) / ТУ 9363-021-39094141-08, серия 02042013/;
– гидроксиэтилкрахмал (ГЭК) /марки 200/05 фармакопейной чистоты/;
– поливинилпирролидон (ПВП) (ФСП 42-0345-4368-03).
Процесс получения композиций проводили при совместной обработке БМК с полимерами в измельчителях-активаторах ударно-истирающего типа [12]. Полученные при этом композиции были исследованы на растворимость в воде, дисперсность, а также методами ИК-спектроскопии и термического анализа для подтверждения стабильности БМК при механообработке (м/о) и образования межмолекулярных комплексов, которые были исследованы в период хранения и вегетации в отношении ризоктониоза и сухих гнилей, а также их влияния на продуктивность культуры.
Биологические испытания. Объектами изучения были: картофель (Solanum tuberosum L.), ризоктониоз картофеля (Rhizoсtonia solani Kuch.), сухие гнили при хранении (Fusarium spp. и Phoma exiqua sp.). Эксперименты проводили на сорте картофеля Любава в хранилище и на полях стационара СибНИИЗиХ СФНЦА РАН в ОПХ «Элитное» Новосибирской области, почвенно-климатические условия которого типичны для лесостепной зоны Западной Сибири в период 2013–2014 годов.
Клубни картофеля обрабатывали препаратами (см. табл. 1) осенью (для определения их биологической эффективности в отношении гнилей при хранении) и весной (против ризоктониоза). В качестве эталона (химического контроля) был выбран разрешенный для применения в РФ препарат на основе БМК – Колфуго Супер, КС (200 г/л). Норма расхода рабочей жидкости при осеннем и весеннем протравливании составляла соответственно 0,25 л/т и 10 л/т, согласно «Списку пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории РФ» [10].
Таблица 1
Состав препаратов и схема опыта с протравливанием клубней картофеля
Вариант защиты |
Состав композиций, условия получения*, содержание БМК |
Норма расхода препарата на тонну клубней картофеля |
|||
по препарату |
по действующему веществу |
||||
осень |
весна |
осень |
весна |
||
Контроль, без обработки |
– |
– |
– |
||
Колфуго Супер КС, химический контроль |
БМК (200 г/л); 20 % |
250 мл |
50 г |
||
Препарат № 1 |
БМК/АГ (1/10); 9 % |
555 г |
100 г |
50 г |
10 г |
Препарат № 2 |
БМК/ ПВП (1/2); 33 % |
150 г |
30 г |
50 г |
10 г |
Препарат № 3 |
БМК/ ГЭК (1/5);16,6 % |
300 г |
60 г |
50 г |
10 г |
Примечание. *препараты № 1, 2 и 3 получены на валковой шаровой мельнице (ВШМ) LE-101 при механообработке в течение 4 ч.
Основные элементы технологии возделывания картофеля соответствовали общепринятым для данного региона [1]. Опыт закладывали согласно методике проведения полевых исследований [3] на естественном инфекционном фоне R. solani. Учет пораженности растений картофеля ризоктониозом проводили через 4, 10 недель после посадки культуры по методике J. Frank [13]. В период вегетации также проводили наблюдения за фенологией растений [8]. Результаты обработаны с применением прикладного пакета программ СНЕДЕКОР [9]. Схемы опытов по осеннему и весеннему применению препаратов на основе БМК представлены в табл. 1.
Результаты исследования и их обсуждение
По результатам ИК-спектральных исследований было показано, что деструкции БМК при его механообработке с полимерами не происходит, а расширение характеристичных полос поглощения БМК говорит об образовании межмолекулярных водородных связей между молекулами БМК и полимеров.
Данные термического анализа показали, что в продуктах механообработки происходит смещение термоэффектов БМК в область в более высоких температур, т.е. образуются энергетически более стабильные системы.
Анализ растворимости БМК и его композиций (см. табл. 2) указывает на то, что все полученные композиции БМК обладают повышенной водорастворимостью по сравнению с исходной субстанцией БМК, причем наибольшая растворимость БМК наблюдается у препарата № 1, что предполагает и соответствующее увеличение биологической активности.
Таблица 2
Растворимость БМК и его композиций с полимерами
Название образца |
Концентрация БМК, г/л |
Увеличение растворимости в воде, кратно |
Карбендазим /БМК/ (исх.) без м/о |
0,008 |
– |
Препарат № 1 |
0,172 |
21,5 |
Препарат № 2 |
0,024 |
3,0 |
Препарат № 3 |
0,015 |
1,9 |
Анализ данных дисперсного состава исходного БМК и его композиций показал что все композиции являются нанодиспергированными твердыми дисперсиями, что также предполагало увеличение биологической активности.
Биологические исследования показали, что все композиции БМК с полимерами (далее препараты № 1, 2 и 3 – см. табл. 1) обладали более высокой эффективностью в отношении возбудителей сухих гнилей при хранении, чем стандартный фунгицид-протравитель – Колфуго Супер (см. табл. 3). Весовой процент больных клубней с сухими гнилями хранения был ниже в 12,5–14,5 раз в сравнении с контрольным вариантом, и в 4,1–4,8 раза в сравнении с химическим контролем.
Таблица 3
Влияние механохимических композиций БМК на сухие гнили при хранении
Вариант защиты |
Весовой процент больных клубней |
Биологическая эффективность, % |
Контроль, без обработки |
4,36 |
– |
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
1,43 |
67,2 |
Препарат № 1 |
0,30 |
93,1 |
Препарат № 2 |
0,35 |
92,0 |
Препарат № 3 |
0,32 |
92,7 |
Установлено, что все предлагаемые препараты при протравливании клубней осенью показали высокую биологическую эффективность против возбудителей фузариозов и фомоза – 92–93 %, тогда как у Колфуго Супер данный показатель был на 25–26 % ниже.
Исследования также показали, что композиции БМК были эффективны и против возбудителя ризоктониоза картофеля, но данный показатель варьировал в зависимости от срока их применения (табл. 4).
Таблица 4
Влияние композиций БМК на развитие ризоктониоза в фазу полных всходов
Вариант защиты |
Развитие ризоктониоза, % |
||
Срок применения фунгицида |
Средние по фактору защита |
||
осень |
весна |
||
Контроль, без обработки |
20,0 |
20,0 |
|
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
7,5 |
2,5 |
5,0 |
Препарат № 1 |
13,3 |
2,5 |
7,9 |
Препарат № 2 |
12,5 |
8,9 |
10,7 |
Препарат № 3 |
2,5 |
5,0 |
3,7 |
Средние по фактору срок |
11,2 |
7,8 |
|
НСР05 |
По факторам: защита – 3,0; срок – 1,3; частных средних – 4,3 |
Было установлено, что все изучаемые препараты в среднем достоверно снижали развитие болезни на всходах картофеля в 1,9–5,4 раза в сравнении с контрольными растениями. Эффективность весеннего протравливания посадочного материала против черной парши была в среднем существенно выше, чем осеннего – в 1,4 раза.
В фазе полных всходов наиболее эффективно снижали развитие ризоктониоза препараты № 1 и № 2 (см. табл. 4) при использовании их весной перед посадкой, тогда как эффективность препарата № 3 не имела существенной разницы в зависимости от срока применения.
Все изучаемые препараты, нанесенные на клубни, как осенью, так и весной, к фазе полных всходов в сравнении с контролем достоверно снижали развитие ризоктониоза, в 1,5–8,0 и 2,3–8,0 раза соответственно. Для Колфуго Супер данный показатель в первом случае составлял 1,8 раза, во втором – 2,6 раза.
Изучение влияния композиций БМК на биометрические показатели культуры в фазе полных всходов показало, что в среднем длина растений не отличалась от таковой в контроле (табл. 5).
Таблица 5
Влияние композиций БМК на длину растений картофеля в фазу полных всходов
Вариант зашиты |
Длина растений картофеля, см |
||
Срок применения фунгицида |
Средние по фактору защита |
||
осень |
весна |
||
Фаза полных всходов |
|||
Контроль, без обработки |
35,0 |
35,0 |
|
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
36,7 |
40,0 |
38,4 |
Препарат № 1 |
35,0 |
34,5 |
34,7 |
Препарат № 2 |
38,0 |
33,5 |
35,7 |
Препарат № 3 |
36,2 |
34,0 |
35,1 |
Средние по фактору срок |
36,2 |
35,4 |
|
НСР05 |
По факторам: защита – 1,5; срок – 0,6; частных средних – 2,1 |
||
Фаза бутонизации-цветения |
|||
Контроль, без обработки |
42,5 |
42,5 |
|
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
42,5 |
40,8 |
41,7 |
Препарат № 1 |
46,7 |
45,8 |
46,3 |
Препарат № 2 |
42,5 |
42,8 |
42,7 |
Препарат № 3 |
41,9 |
36,7 |
39,3 |
Средние по фактору срок |
43,2 |
41,7 |
|
НСР05 |
По факторам: защита – 3,0; срок – 1,3 частных средних – 4,3 |
В среднем срок применения композиций БМК сказывался на росте культуры, как в период полных всходов, так и в фазе бутонизации-цветения. Использование препаратов осенью существенно увеличивало длину растений на 0,8–1,5 см, в сравнении с весенней обработкой.
Нанесение на клубни осенью препарата № 2 (см. табл. 5) способствовало существенному увеличению высоты растений в фазе полных всходов, а использование препарата № 1 в период бутонизации-цветения – на 3,0 и 4,2 см соответственно. При обработке клубней перед посадкой рост растений в фазе бутонизации-цветения достоверно увеличивал препарат № 1. В варианте с препаратом № 3 (клубни обработаны весной, фаза бутонизация-цветение) отмечено достоверное снижение данного показателя.
Композиции БМК оказывали влияние не только на длину растений, но и на их массу (табл. 6). В среднем достоверно увеличивали данный показатель препараты № 2 и № 3 (фаза полных всходов) на 12,5–31,3 г/растение в сравнении с контролем, а Колфуго Супер увеличивал массу растения на 23,8 г. К фазе бутонизации-цветения все изучаемые препараты в среднем существенно повышали массу картофеля на 26,7–47,4 г/растение, тогда как в варианте с химическим контролем эта величина составила 22,9 г/растение.
Таблица 6
Влияние композиций БМК на массу растения картофеля в фазу полных всходов
Вариант защиты |
Масса растения картофеля, г/растение |
||
Срок применения фунгицида |
Средние по фактору защита |
||
осень |
весна |
||
Фаза полных всходов |
|||
Контроль, без обработки |
125,0 |
125,0 |
|
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
130,0 |
167,5 |
148,8 |
Препарат № 1 |
100,0 |
135,0 |
117,5 |
Препарат № 2 |
142,5 |
132,5 |
137,5 |
Препарат № 3 |
170,0 |
142,5 |
156,3 |
Средние по фактору срок |
133,5 |
140,5 |
|
НСР05 |
По факторам: защита – 10,7; срок – 4,6 частных средних – 15,1 |
||
Фаза бутонизации-цветения |
|||
Контроль, без обработки |
130,1 |
130,1 |
|
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
133,5 |
172,5 |
153,0 |
Препарат № 1 |
166,5 |
173,0 |
169,8 |
Препарат № 2 |
175,0 |
180,0 |
177,5 |
Препарат № 3 |
170,0 |
143,7 |
156,8 |
Средние по фактору срок |
155,0 |
159,9 |
|
НСР05 |
По факторам: защита – 12,8; срок – 5,4; частных средних – 18,1 |
В целом к фазе полных всходов существенную прибавку массы при обоих сроках применения защитных составов обеспечил препарат № 3 (на 17,5–45,0 г/растение), а также препарат № 2 в случае его использования осенью (на 17,5 г/растение) в сравнении с контролем. В фазе бутонизации-цветения существенное увеличение данного показателя наблюдали в вариантах с осенним протравливанием всеми изучаемыми препаратами (на 36,4–41,5 г/растение), и в случае весеннего использования препаратов № 1 и № 2 (на 42,9–49,9 г/растение).
Комплексное действие композиций БМК на развитие заболевания, развитие и рост растений картофеля обусловило изменение урожайности культуры (табл. 7).
Таблица 7
Влияние композиций БМК на урожайность культуры
Вариант защиты |
Урожайность культуры, т/га |
Прибавка урожайности, % |
|||
Срок применения фунгицида |
Средние по фактору защита |
||||
осень |
весна |
осень |
весна |
||
Контроль, без обработки |
8,30 |
8,30 |
– |
||
Колфуго Супер, КС (200 г/л), химический контроль |
9,82 |
11,96 |
10,89 |
18,3 |
44,1 |
Препарат № 1 |
10,64 |
10,56 |
10,60 |
28,2 |
27,2 |
Препарат № 2 |
9,87 |
11,03 |
10,45 |
18,9 |
32,9 |
Препарат № 3 |
11,21 |
13,05 |
12,13 |
35,1 |
57,2 |
Средние по фактору срок |
9,97 |
10,98 |
|||
НСР05 |
По факторам: защита – 1,31; срок – 0,56; частных средних 1,85 |
В среднем все изучаемые препараты достоверно повышали урожайность культуры на 1,52–4,75 т/га. Максимальную прибавку урожая из всех экспериментальных композиций обеспечил препарат № 3. При осеннем протравливании она составила 2,91 т/га, а при весеннем – 4,75 т/га. Препарат № 1 позволил получить одинаковый дополнительный урожай в размере 2,3 т/га, как при осеннем, так и весеннем сроке его использования. Наилучшим сроком использования композиции № 2 оказалась весна, в этом случае урожайность картофеля была на 2,73 т/га выше, чем в контроле. Колфуго Супер был наиболее эффективен в случае весеннего протравливания посадочного материала (прибавка составила 3,66 т/га).
Выводы
1. Наибольшую биологическую эффективность против сухих гнилей при хранении показали все композиции БМК с полимерами.
2. Максимальную продуктивность у растений картофеля наблюдали при использовании препарата № 3 (прибавка урожая в сравнении с контролем 35 % – осеннее протравливание и 57 % – весеннее). У препаратов № 1 и № 2 данный показатель составил 28 и 19 % при осеннем протравливании, а также 27 и 33 % при весеннем соответственно.
3. Более всего снижали развитие ризоктониоза в период вегетации препараты № 2 и № 3.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 15-29-05792).