Глобализация экономики привела к интенсификации сельского хозяйства, которая в последние годы стала ориентироваться на биотехнологические методы, альтернативные химическим. Такие способы ведения аграрного производства основаны на его экологизации и повышении биологического потенциала почвы за счет возобновляемых ресурсов, к которым относится почвенная микрофлора. Поэтому применение эндофитных ризобактериальных штаммов, способных стимулировать ростовые процессы [1], оказывать протекторные свойства в условиях стресса [2–4], активизировать физиологические процессы, также повышать показатели продуктивности [5]. Положительный эффект эндофитных ризобактерий основан на их способности не только колонизировать ризосферу после их искусственного внесения (инокуляции), но и проникать внутрь растительных тканей и транспортироваться по всему растительному организму [6]. При этом отзывчивость растения определенного вида и даже сорта на конкретный ризобактериальный штамм может существенно отличаться [7], что требует каждый раз нового изучения.
Объектом нашего исследования служили две наиболее распространенные по возделыванию луковичные культуры: лук репчатый и чеснок посевной [8, 9]. Практическая цель нашего исследования состояла в оценке эффективности инокуляции лука репчатого и чеснока посевного ассоциативными эндофитными штаммами ризобактерий на морфофизиологические процессы и продуктивность.
Материалы и методы исследования
Объектом работы являлись лук репчатый (Allium cepa L.) сорт Центурион и чеснок посевной (Allium sativum L.) сорт Гарпек испанской селекции, родственный по своим хозяйственным признакам отечественному сорту Алькор. Полевые опыты проводились по стандартной методике [10] на опытном поле агробиостанции ФГБОУ ВПО «Российский государственный педагогический университет имени А.И. Герцена» в Ленинградской области в 2018–2019, 2021 гг. Опыты закладывались весной. Повторность каждого варианта эксперимента четырехкратная. Для работы были отобраны биопрепараты на основе эндофитных бактерий, созданных Всероссийским НИИ сельскохозяйственной микробиологии РАСХН: Мизорин (Arthrobacter mysorens, штамм 7), Флавобактерин (Flavobacterium sp. штамм 30) и Псевдомонас (Pseudomonas fluorescens штамм ПГ-5).
Инокуляция (бактеризация) эндофитными ризобактериями культурных растений осуществляется тремя способами: семенным, корневым (для рассады) и листовым (для листовых культур) [11]. Для луковичных культур нами был использован корневой инокуляционный метод. Процесс корневой инокуляции луковиц проводился перед их посевом в соответствии с разработанными рекомендациями [12–14]. В контроле семена вместо бактериальной суспензии поливались водой.
Полевые опыты были заложены на слабо окультуренной супесчаной дерново-слабоподзолистой почве. На протяжении четырех лет на этой площади проводился уравнительный посев из ячменно-овсяной смеси.
Приживаемость луковиц учитывалась на седьмой день после их посева. Морфометрические показатели высоты и числа листьев, а также продуктивность зеленой надземной массы лука репчатого учитывали в фазе полных всходов укосным методом в начале пожухлости кончиков листьев. Сбор урожая луковиц лука репчатого и чеснока посевного проводили на третий день стадии полного увядания надземной части. Водоудерживающая способность листьев оценивалась методом «увядания» по Арланду [15] в фазу полных всходов. Полученные экспериментальные результаты обрабатывались статистическим методом дисперсионного анализа с использованием табличного процессора Microsoft Excel [16].
На основании оценки продуктивности луковичных культур был проведен экономический анализ изменения абсолютных значений дохода от их реализации в отношении контрольных значений, где процесс инокуляции не проводился. В качестве критерия эффективности использовалась оценка экономического эффекта от инокуляции эндофитными ризобактериями луковичных культур. Экономическая эффективность инокуляции луковичных культур определялась по формуле
ЭЭij = (Дij / Дi0) ∙ 100,
ЭЭij – экономическая эффективность от инокуляции i-й луковичной культуры j-м препаратом, %;
Дij – доход от реализации i-й луковичной культуры при инокуляции j-м препаратом, тыс. руб.;
Дi0 – доход от реализации i-й луковичной культуры без инокуляции (контроль), тыс. руб.
Данный аналитический подход был нами достаточно подробно описан и применен при изучении результатов проведения микробиологической инокуляции при возделывании других культур [17].
Результаты исследования и их обсуждение
Морфогенез и формирование урожая луковичных культур во многом определяется таким важным физиологическим показателем, как выживаемость луковиц. Это связано с тем, что биохимические процессы, которые протекают в период формирования почки возобновления, отражаются на всех последующих фазах развития растения. В наших полевых опытах была показана стимулирующая роль эндофитных ассоциативных бактерий на прорастание луковиц (табл. 1). На протяжении всех лет исследования опытные варианты с применением биопрепаратов достоверно отличались наибольшей приживаемостью. У лука репчатого в среднем по трехлетним данным наибольшую эффективность проявляли Псевдомонас (92 %) и Флавобактерин (89 %), что превышало контроль (57 %) на 35 и 32 % соответственно. В опытах с чесноком наблюдалась аналогичная ситуация. В вариантах с данными препаратами по средним показателям приживаемость луковиц составляла 91 % (Псевдомонас) и 90 % (Флавобактерин) при показателях контроля 59 %.
Установлено, что эндофитные ризобактерии способствовали повышению ростовых процессов: высоты и числа листьев (табл. 2). Анализ результатов, полученных на фазе полных всходов лука, показал увеличение высоты листьев в опытах с Псевдомонасом и Флавобактерином на 57 % (60,3 см) и 50 % (57,6 см) относительно контроля (38,4 см). Высота листьев чеснока при использовании этих препаратов по отношению к контролю (34,7 см) также была максимальна – 57,0 и 55,3 см соответственно.
Кроме того, в опытах отмечалось увеличение числа формирования листьев. Применение эндофитных бактерий из числа псевдомонад стимулировало рост этого параметра в среднем на 60 % (7,7 шт./раст.), а флавобактерий – на 56 % (7,5 шт./раст.) больше контрольных значений (4,8 шт./раст.). При этом у чеснока посевного в среднем достаточно резкое возрастание количества листьев отмечено при использовании Псевдомонаса – на 77 % (6,9 шт./раст.), по сравнению не только с неинокулированным контролем (3,9 шт./раст.), но и с другими опытными вариантами (5,1–5,4 шт./раст.).
Таблица 1
Влияние ассоциативных ризобактериальных препаратов на приживаемость луковиц
Вариант |
Лук репчатый |
Чеснок посевной |
||||||||
2018 |
2019 |
2021 |
Среднее за 3 года |
2018 |
2019 |
2021 |
Среднее за 3 года |
|||
% |
% |
% |
% |
Δ % |
% |
% |
% |
% |
Δ % |
|
Контроль |
59 |
49 |
64 |
57 |
– |
58 |
57 |
61 |
59 |
– |
Мизорин |
74 |
67 |
58 |
66 |
+9 |
70 |
74 |
69 |
71 |
+12 |
Флавобактерин |
91 |
88 |
87 |
89 |
+32 |
89 |
88 |
92 |
90 |
+32 |
Псевдомонас |
91 |
96 |
89 |
92 |
+35 |
85 |
93 |
95 |
91 |
+33 |
НСР0,5 |
2,9 |
2,4 |
3,1 |
2,5 |
– |
2,7 |
2,5 |
2,3 |
2,4 |
– |
Таблица 2
Действие ассоциативных эндофитных бактерий на высоту и число листьев лука репчатого и чеснока посевного (среднее за 3 года)
Вариант |
Лук репчатый |
Чеснок посевной |
||||||
Высота листьев |
Число листьев |
Высота листьев |
Число листьев |
|||||
См |
% |
шт./раст. |
% |
см |
% |
шт./раст. |
% |
|
Контроль |
38,4 |
100 |
4,8 |
100 |
34,7 |
100 |
3,9 |
100 |
Мизорин |
53,7 |
140 |
6,3 |
131 |
48,9 |
141 |
5,4 |
138 |
Флавобактерин |
57,6 |
150 |
7,5 |
156 |
55,3 |
159 |
5,1 |
131 |
Псевдомонас |
60,3 |
157 |
7,7 |
160 |
57,0 |
164 |
6,9 |
177 |
НСР0,5 |
2,5 |
– |
0,2 |
– |
1,8 |
– |
1,9 |
– |
Рис. 1. Влияние ризобактерий на водоудерживающую способность листьев лука репчатого
Рис. 2. Влияние ризобактерий на водоудерживающую способность листьев чеснока посевного
Одним из показателей интенсивности физиологических процессов у растительных организмов является сохранение определенного уровня подвижности воды в их тканях. Поэтому определенным критерием устойчивости растений к неблагоприятным факторам среды служит водоудерживающая способность, как показатель наличия связанной и осмотически не активной формы воды.
В наших экспериментах у всех опытных вариантов на обеих культурах отмечалась сравнительно низкая водоудерживающая способность листьев относительно контроля (рис. 1, 2). Наиболее эффективным эндофитным ризобактериальным штаммом оказался Pseudomonas fluorescens штамм ПГ-5 в одноименном биопрепарате. После бактеризации им корней лука и чеснока листья растений в итоге за 5 часов теряли только 23,5 и 20,1 % влаги соответственно. Эти данные водоудерживающей способности на 17,6 % (лук) и 19,6 % (чеснок) меньше вариантов, где инокуляция нами не проводилась.
Таблица 3
Влияние микробиологических штаммов на урожайные процессы растений лука репчатого и чеснока посевного, ц/га (среднее за 3 года)
Вариант |
Лук репчатый |
Чеснок посевной |
||||
Зеленая масса |
Масса луковиц |
Масса луковиц |
||||
ц/га |
% |
ц/га |
% |
ц/га |
% |
|
Контроль |
10,2 |
100 |
70,9 |
100 |
37,8 |
100 |
Мизорин |
15,9 |
156 |
85,8 |
121 |
43,5 |
115 |
Флавобактерин |
16,8 |
165 |
108,5 |
153 |
54,8 |
145 |
Псевдомонас |
17,3 |
170 |
119,1 |
168 |
62,0 |
164 |
НСР0,5 |
2,3 |
– |
2,5 |
– |
2,9 |
– |
Таблица 4
Доход от реализации урожая луковичных культур с 1 га
Вариант |
Лук репчатый |
Чеснок посевной |
||||
Зеленая масса |
Масса луковиц |
Масса луковиц |
||||
тыс. руб. |
% |
тыс. руб. |
% |
тыс. руб. |
% |
|
Контроль |
153,0 |
100,0 |
120,5 |
100,0 |
423,4 |
100,0 |
Мизорин |
238,5 |
155,9 |
145,9 |
121,0 |
487,2 |
115,1 |
Флавобактерин |
252,0 |
164,7 |
108,5 |
153,0 |
613,8 |
145,0 |
Псевдомонас |
259,5 |
169,6 |
202,5 |
169,6 |
694,4 |
164,0 |
Наблюдаемые нами ранее морфофизиологические изменения нашли свое отражение и в формировании урожайных показателей исследованных культур (табл. 3). В опыте с луком репчатым урожайность зеленой массы в среднем за три года возрастала относительно контроля (10,2 ц/га) до 17,3 ц/га в опытном варианте Псевдомонасом и до 16,8 ц/га при использовании Флавобактерина.
Аналогичное позитивное влияние данных эндофитных бактерий нами отмечалось на увеличении массы луковиц Allium cepa L. на 68 % (Псевдомонас) и на 53 % (Флавобактерин), к контролю (70,9 ц/га).
Масса луковиц-головок чеснока посевного была максимальной также в варианте с применением Псевдомонаса – 62,0 ц/га, что на 64 % выше контрольных значений (37,8 ц/га). В других опытных вариантах эффект от корневой инокуляции эндофитными ризобактериями был менее значительным (43,5–54,8 ц/га), хотя показатели достоверно отличались от показателей урожайности в контроле.
Рассмотренная ранее биологическая эффективность инокуляции на луковичные культуры находит свое отражение и при оценке экономического эффекта от реализации такой продукции аграрным предприятием (табл. 4).
Доход сельскохозяйственных предприятий от реализации луковичных культур при инокуляции эндофитными бактериями в сравнении с контролем стремительно возрастает. По нашей оценке, среднее увеличение дохода по луку репчатому:
– при реализации зеленой массы составит 63,4 %,
– при реализации луковиц превышение дохода к контрольной группе составит 47,3 %.
Аналогичный эффект наблюдается и по чесноку посевному – среднее увеличение дохода достигает в наших опытах 41,4 %.
Набольшая экономическая эффективность достигалась
– по луку репчатому при реализации зеленой массы и луковиц с применением Псевдомонаса – 69,9 % по сравнению с контролем;
– по чесноку при реализации луковиц с применением Псевдомонаса – 64,0 %
Заключение
Таким образом, предпосевная инокуляция луковиц исследованных растений лука репчатого и чеснока посевного эндофитными ризобактериальными штаммами стимулирует их морфофизиологические процессы и способствует повышению урожайных показателей. Наиболее эффективным оказалось применение биопрепарата Псевдомонас (Pseudomonas fluorescens штамм ПГ-5) на обеих культурах. В данном опытном варианте по отношению к контролю повышается приживаемость луковиц лука (на 35 %) и чеснока (на 33 %), увеличивается линейный рост (у лука – на 57 %; у чеснока – на 60 %) и число листьев (у лука – на 64 %; у чеснока – на 77 %). При этом урожайность зеленой массы лука повышалась на 70 %, а масса сформировавшихся луковиц на 68 % относительно контроля. Биомасса луковиц чеснока также превышала контрольный показатель на 64 %. Кроме того, именно в данном опытном варианте отмечалась наибольшая водоудерживающая способность, а растения теряли влагу на 17,6 % (лук) и 19,6 % (чеснок) меньше контроля.
В результате анализа экономического эффекта установлена возможность увеличения доходов предприятий аграрного сектора от реализации луковичных культур при условии проведения перед посевом инокулирования посадочного материала эндофитными бактериями ризосферы.