Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,823

ПРИМЕНЕНИЕ КРИОАНАБИОЗА ДЛЯ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ЯДРОСОДЕРЖАЩИХ КЛЕТОК КРОВИ ПРИ НИЗКОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ

Сведенцов Е.П. Туманова Т.В. Соломина О.Н. Щеглова О.О. Худяков А.Н.
Целью работы явилась разработка эффективного метода консервирования ядросодержащих клеток крови в состоянии холодового анабиоза. Новизна предложенного метода заключается в том, что впервые введение лейкоцитов крови человека в состояние криоанабиоза при низкой температуре (-80°С) осуществлялось по нелинейной программе замораживания, при этом клетки находились под защитой оригинального ограждающего раствора, в состав которого входят два криопротектора (проникающего действия - ДМСО и смешанного действия - ГМБТОЭМ), а также вещество, обладающее антиоксидантным и мембраностабилизирующим действием. Концентрации компонентов не указываются, т.к. подана заявка на изобретение. Данный раствор не требует отмывания от биообъекта - входящие в его состав компоненты являются не токсичными

В качестве объекта исследования применялись лейкоцитные концентраты доноров-добровольцев (n=6). Всего проведено более 200 тестирований. Перед замораживанием биообъект в пластикатном контейнере «Компопласт 300» смешивали с криозащитным раствором в соотношении 1:1, выдерживали при комнатной температуре 20 мин и погружали в металлическую 4-х литровую ванну электроморозильника «Криостат», заполненную 960 этанолом и охлажденную до -280С. После замораживания объекта до названной температуры контейнеры с клетками переносили в электроморозильник на -800С, где их выдерживали одни сутки и размораживали в 20-литровой водяной ванне (+380С) в течение 45-60 сек при интенсивном покачивании контейнера. Установлено, что после одних суток холодового анабиоза сохраняется 96,83±4,17% лейкоцитов, из которых 88,6±7,30% имеют неповрежденную мембрану (устойчивы к эозину), 75,5±8,50% нейтрофилов сохраняют способность к фагоцитозу, а их кислородзависимая бактерицидная активность (по данным НСТ-теста) в сравнении с исходным уровнем повышается в 4 раза. Сохранность лизосомально-катионных белков составляет 91,67±4,62%. Содержание лимфоцитов, моноцитов и гранулоцитов не изменяется.

Предложенный метод является не только эффективным, но и экономичным, т.к. не требует дорогостоящего криогенного оборудования и использует доступный малотоксичный ограждающий раствор. Данная технология может найти широкое применение в научных лабораториях медицинского и биологического профиля.


Библиографическая ссылка

Сведенцов Е.П., Туманова Т.В., Соломина О.Н., Щеглова О.О., Худяков А.Н. ПРИМЕНЕНИЕ КРИОАНАБИОЗА ДЛЯ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ЯДРОСОДЕРЖАЩИХ КЛЕТОК КРОВИ ПРИ НИЗКОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ // Успехи современного естествознания. – 2006. – № 6. – С. 47-48;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=10575 (дата обращения: 20.09.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074