Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,736

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЯДРЫШЕК В ЯДРАХ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МАЛЫХ ЭТНИЧЕСКИХ ГРУПП КУЗБАССА

Минина В.И. Ахматьянова В.Р. Савченко Я.С. Ветрова И.В Ковальская Т.Н. Ярунова Е.Н.
В настоящее время интерес к ядрышковому показателю вновь возрастает среди специалистов в области медицины и биологии. Это связано с тем, что на основании полученных данных о структуре ядрышек, их размерах, форме и количестве можно судить о степени функциональной активности рибосомных генов, входящих в состав интерфазных ядрышек. Особое внимание направлено на изучение данного показателя у представителей малых этнических групп Сибири. Это обусловлено тем, что представители таких популяций в большинстве случаев живут компактно на одной определённой территории в течение многих поколений. В результате этого в таких популяциях могут накапливаться определённые морфофункциональные, биохимические варианты, а также генетические маркёры. В связи с этим нами был проведен количественный анализ ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови у представителей таких этнографических групп Кемеровской области, как телеуты, калмаки, шорцы и русские.

Материалы и методы.

Для анализа количества ядрышек периферической крови осуществляли подготовку препаратов с использованием стандартного полумикрометода культивирования лимфоцитов [Hungerford P.,1964].

Изучение ядрышек проводили на препаратах хромосом, окрашенных раствором азотнокислого серебра по методу Howell W.M. и Black D.A [1980] с некоторыми модификациями [Ляпунова Н.А., 1998].

На препаратах, приготовленных от каждого обследованного, было подсчитано количество ядрышек в 100 ядрах лимфобластов.

Результаты.

На основе количественного анализа ядрышек мы получили возможность выявления некоторых этнических особенностей. Полученные результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1. Количество ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови у народов Кемеровской области

Группа

Количество ядрышек в ядрах лимфоцитов

Клеток

M ± m

Min - Max

Русские (г. Кемерово)

55000

2,64 ± 0,07

1,66 - 4,47

Телеуты (п. Беково)

66000

2,57 ± 0,08

1,68 - 4,49

Шорцы (г. Таштагол)

28000

1,68 ± 0,04*

1,36 - 2,16

Калмаки (п. Юрт-Константиново)

25000

1,78 ± 0,05*

1,45 - 2,67

* достоверно отличается от русских жителей р < 0,0001

Из таблицы видно, что среднее число ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови у телеутов, шорцев и калмаков меньше, чем у русских жителей Кемеровской области. Достоверно значимые отличия от русских жителей были отмечены в группах шорцев и калмаков (UM-W=16,5 и 25,5). В целом, полученные данные могут свидетельствовать о существовании этнических особенностей пространственного расположения хромосом, несущих рибосомные гены.

Известно, что на пространственную организацию ядра могут влиять различные факторы, вызывающие повреждение структуры хромосом, например, радиация. В изученных группах ранее был проведен анализ частоты хромосомных аберраций [Дружинин В.Г., 2003] в лимфоцитах периферической крови (табл.2). Из таблицы видно, что самые высокие значения по уровню хромосомных нарушений были отмечены в группе шорцев - 5,80%. В тоже время, среднее число ядрышек на ядро у них самое низкое (1,68 на ядро), т.е. в данной этнической группе хромосомный мутагенез не оказывал значимого влияния на пространственную организацию ядра и формирование ядрышек. Это справедливо также и для группы калмаков.

Таблица 2. Частота аберрантных метафаз в изученных группах

Группа

Частота хромосомных аберраций (%)

n

M±m

Min-Max

Русские

51

3,46 ± 0,35

0 - 13,0

Телеуты

66

2,73 ± 0,25

0 - 9,5

Шорцы

26

5,80 ± 0,63*

0 - 15,9

Калмаки

25

3,79 ± 0,55

0 - 9,0

 * достоверно выше по сравнению с другими группами р<0,05

Группы телеутов и русских доноров по частоте аберрантных метафаз достоверно друг от друга не отличаются. Эти же группы достоверно не различаются по количеству ядрышек в ядре.

На следующем этапе исследования всех обследованных доноров разделили на две группы в зависимости от индивидуальной частоты хромосомных аберраций (ХА). Исходя из того, что общепопуляционный уровень хромосомных мутаций в Кемеровской области составляет 2,86% [Дружинин В.Г., 2003] были сформированы группы доноров с индивидуальной частотой ХА менее 3% и 3% и выше. В связи с этим был проведен учет количества ядрышек в зависимости от частоты хромосомных аберраций у представителей разных этнографических групп Кемеровской области (табл.3).

Таблица 3. Количество ядрышек в зависимости от частоты хромосомных аберраций

Группа

ХА < 3

ХА >= 3

n

M ± m

n

M ± m

Русские (общ)

24

2,68 ±0,12

27

2,61 ± 0,09

Телеуты

45

2,29 ± 0,05*

20

3,20 ± 0,17

Шорцы

5

1,56 ± 0,05

21

1,73 ± 0,05

Калмаки

13

1,66 ± 0,03

12

1,78 ± 0,09

* достоверно отличается от ХА>=3, Р<0,05

Было выявлено, что у телеутов среднее число ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови при частоте ХА менее 3%, достоверно меньше, чем при частоте ХА более 3%. У русских жителей Кемеровской области такая закономерность не обнаружена.

Данный факт может свидетельствовать о том, что у телеутов ядрышковый показатель является специфическим маркером повышенной индивидуальной токсико-генетической чувствительности к факторам среды.

Кроме этого, во всех исследуемых группах был проведен анализ частоты встречаемости клеток с различным числом ядрышек (от 1 до 6). Было выявлено, что вне зависимости от национальности чаще всего встречались клетки с 1-3 ядрышками на ядро.

У шорцев и калмаков частота встречаемости клеток с большим количеством ядрышек (4 и более) заметно меньше, чем у представителей других этнических групп.

При сравнении всех распределений с помощью критерия χ2 было показало существование достоверно значимых отличий (лишь распределения в группах телеутов и русских достоверно не отличались).

Таким образом, на основании полученных результатов можно сделать следующие выводы:

  1. вне зависимости от национальной принадлежности во всех группах чаще всего встречались клетки с одним - тремя ядрышками в ядре;
  2. в группах шорцев и калмаков отмечено достоверно меньшее количество ядрышек в лимфоцитах, чем в группах русских жителей Кузбасса и телеутов;
  3. несмотря на высокие значения хромосомных мутаций у шорцев и калмаков пространственная организация ядра у них не претерпевает существенных изменений;
  4. по среднему количеству ядрышек в лимфоцитах группа телеутов достоверно не отличается от группы русских жителей Кузбасса;
  5. в группе телеутов выявлена следующая особенность: у индивидов с повышенными значениями частоты аберрантных метафаз наблюдались и более высокое число ядрышек в лимфоцитах.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

  1. Дружинин В.Г. Хромосомные нарушения у населения крупного промышленного региона: пространственно-временной цитогенетический мониторинг. - Автореферат докторской диссертации. М., 2003.
  2. Ляпунова Н.А., Кравец-Мандрон И.А., Цветкова Т.Г. Цитогенетика ядрышкообразующих районов (ЯОР) хромосом человека: выделение четырех морфофункциональных вариантов ЯОР, их межиндивидуальное и межхромосомное распределение //Генетика. - 1998. - Т.34. - № 9. - С. 1298 - 1306.
  3. Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleolus organizer regions a protective colloidal developer: a one step method //Experienta. - 1980. - V. 36. - P. 1014-1015.
  4. Hungerford D.A. Leucocytes cultured from small inocula of whole blood and preparation of methaphase chromosomes by treatment with hypotonic KCl //Stain. Technol. - 1964. - Vol. 40. - P. 333 - 338.

Библиографическая ссылка

Минина В.И., Ахматьянова В.Р., Савченко Я.С., Ветрова И.В, Ковальская Т.Н., Ярунова Е.Н. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЯДРЫШЕК В ЯДРАХ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МАЛЫХ ЭТНИЧЕСКИХ ГРУПП КУЗБАССА // Успехи современного естествознания. – 2005. – № 10. – С. 69-71;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=9339 (дата обращения: 23.10.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074