Материалы и методы.
Для анализа количества ядрышек периферической крови осуществляли подготовку препаратов с использованием стандартного полумикрометода культивирования лимфоцитов [Hungerford P.,1964].
Изучение ядрышек проводили на препаратах хромосом, окрашенных раствором азотнокислого серебра по методу Howell W.M. и Black D.A [1980] с некоторыми модификациями [Ляпунова Н.А., 1998].
На препаратах, приготовленных от каждого обследованного, было подсчитано количество ядрышек в 100 ядрах лимфобластов.
Результаты.
На основе количественного анализа ядрышек мы получили возможность выявления некоторых этнических особенностей. Полученные результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1. Количество ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови у народов Кемеровской области
Группа |
Количество ядрышек в ядрах лимфоцитов |
||
Клеток |
M ± m |
Min - Max |
|
Русские (г. Кемерово) |
55000 |
2,64 ± 0,07 |
1,66 - 4,47 |
Телеуты (п. Беково) |
66000 |
2,57 ± 0,08 |
1,68 - 4,49 |
Шорцы (г. Таштагол) |
28000 |
1,68 ± 0,04* |
1,36 - 2,16 |
Калмаки (п. Юрт-Константиново) |
25000 |
1,78 ± 0,05* |
1,45 - 2,67 |
* достоверно отличается от русских жителей р < 0,0001
Из таблицы видно, что среднее число ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови у телеутов, шорцев и калмаков меньше, чем у русских жителей Кемеровской области. Достоверно значимые отличия от русских жителей были отмечены в группах шорцев и калмаков (UM-W=16,5 и 25,5). В целом, полученные данные могут свидетельствовать о существовании этнических особенностей пространственного расположения хромосом, несущих рибосомные гены.
Известно, что на пространственную организацию ядра могут влиять различные факторы, вызывающие повреждение структуры хромосом, например, радиация. В изученных группах ранее был проведен анализ частоты хромосомных аберраций [Дружинин В.Г., 2003] в лимфоцитах периферической крови (табл.2). Из таблицы видно, что самые высокие значения по уровню хромосомных нарушений были отмечены в группе шорцев - 5,80%. В тоже время, среднее число ядрышек на ядро у них самое низкое (1,68 на ядро), т.е. в данной этнической группе хромосомный мутагенез не оказывал значимого влияния на пространственную организацию ядра и формирование ядрышек. Это справедливо также и для группы калмаков.
Таблица 2. Частота аберрантных метафаз в изученных группах
Группа |
Частота хромосомных аберраций (%) |
||
n |
M±m |
Min-Max |
|
Русские |
51 |
3,46 ± 0,35 |
0 - 13,0 |
Телеуты |
66 |
2,73 ± 0,25 |
0 - 9,5 |
Шорцы |
26 |
5,80 ± 0,63* |
0 - 15,9 |
Калмаки |
25 |
3,79 ± 0,55 |
0 - 9,0 |
* достоверно выше по сравнению с другими группами р<0,05
Группы телеутов и русских доноров по частоте аберрантных метафаз достоверно друг от друга не отличаются. Эти же группы достоверно не различаются по количеству ядрышек в ядре.
На следующем этапе исследования всех обследованных доноров разделили на две группы в зависимости от индивидуальной частоты хромосомных аберраций (ХА). Исходя из того, что общепопуляционный уровень хромосомных мутаций в Кемеровской области составляет 2,86% [Дружинин В.Г., 2003] были сформированы группы доноров с индивидуальной частотой ХА менее 3% и 3% и выше. В связи с этим был проведен учет количества ядрышек в зависимости от частоты хромосомных аберраций у представителей разных этнографических групп Кемеровской области (табл.3).
Таблица 3. Количество ядрышек в зависимости от частоты хромосомных аберраций
Группа |
ХА < 3 |
ХА >= 3 |
||
n |
M ± m |
n |
M ± m |
|
Русские (общ) |
24 |
2,68 ±0,12 |
27 |
2,61 ± 0,09 |
Телеуты |
45 |
2,29 ± 0,05* |
20 |
3,20 ± 0,17 |
Шорцы |
5 |
1,56 ± 0,05 |
21 |
1,73 ± 0,05 |
Калмаки |
13 |
1,66 ± 0,03 |
12 |
1,78 ± 0,09 |
* достоверно отличается от ХА>=3, Р<0,05
Было выявлено, что у телеутов среднее число ядрышек в ядрах лимфоцитов периферической крови при частоте ХА менее 3%, достоверно меньше, чем при частоте ХА более 3%. У русских жителей Кемеровской области такая закономерность не обнаружена.
Данный факт может свидетельствовать о том, что у телеутов ядрышковый показатель является специфическим маркером повышенной индивидуальной токсико-генетической чувствительности к факторам среды.
Кроме этого, во всех исследуемых группах был проведен анализ частоты встречаемости клеток с различным числом ядрышек (от 1 до 6). Было выявлено, что вне зависимости от национальности чаще всего встречались клетки с 1-3 ядрышками на ядро.
У шорцев и калмаков частота встречаемости клеток с большим количеством ядрышек (4 и более) заметно меньше, чем у представителей других этнических групп.
При сравнении всех распределений с помощью критерия χ2 было показало существование достоверно значимых отличий (лишь распределения в группах телеутов и русских достоверно не отличались).
Таким образом, на основании полученных результатов можно сделать следующие выводы:
- вне зависимости от национальной принадлежности во всех группах чаще всего встречались клетки с одним - тремя ядрышками в ядре;
- в группах шорцев и калмаков отмечено достоверно меньшее количество ядрышек в лимфоцитах, чем в группах русских жителей Кузбасса и телеутов;
- несмотря на высокие значения хромосомных мутаций у шорцев и калмаков пространственная организация ядра у них не претерпевает существенных изменений;
- по среднему количеству ядрышек в лимфоцитах группа телеутов достоверно не отличается от группы русских жителей Кузбасса;
- в группе телеутов выявлена следующая особенность: у индивидов с повышенными значениями частоты аберрантных метафаз наблюдались и более высокое число ядрышек в лимфоцитах.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Дружинин В.Г. Хромосомные нарушения у населения крупного промышленного региона: пространственно-временной цитогенетический мониторинг. - Автореферат докторской диссертации. М., 2003.
- Ляпунова Н.А., Кравец-Мандрон И.А., Цветкова Т.Г. Цитогенетика ядрышкообразующих районов (ЯОР) хромосом человека: выделение четырех морфофункциональных вариантов ЯОР, их межиндивидуальное и межхромосомное распределение //Генетика. - 1998. - Т.34. - № 9. - С. 1298 - 1306.
- Howell W.M., Black D.A. Controlled silver-staining of nucleolus organizer regions a protective colloidal developer: a one step method //Experienta. - 1980. - V. 36. - P. 1014-1015.
- Hungerford D.A. Leucocytes cultured from small inocula of whole blood and preparation of methaphase chromosomes by treatment with hypotonic KCl //Stain. Technol. - 1964. - Vol. 40. - P. 333 - 338.
Библиографическая ссылка
Минина В.И., Ахматьянова В.Р., Савченко Я.С., Ветрова И.В, Ковальская Т.Н., Ярунова Е.Н. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЯДРЫШЕК В ЯДРАХ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МАЛЫХ ЭТНИЧЕСКИХ ГРУПП КУЗБАССА // Успехи современного естествознания. – 2005. – № 10. – С. 69-71;URL: https://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=9339 (дата обращения: 17.08.2024).