Эндометриоз дисгормоналное, иммунозависимое и генетически обусловленное заболевания с доброкачественным разрастанием ткани, сходной по морфологическому строению и функции с эндометрием, но находящейся за пределами матки [1].
Больные с различными формами этой патологии страдают стойким болевым синдромом, нарушениями менструального цикла, дисфункциональными маточными кровотечениями и подвергаются многократным лечебно - диагностическим выскабливанием матки, оперативным вмешательствам, нередко бесполезным терапевтическим воздействием. [3]
Тазовая боль и вегетативно-сосудистые нарушения заставляют этих женщин обращаться ко многим специалистам, в том числе к психиатрам и психоневрологам.
Частота заболевания у женщин репродуктивного возраста, по данным различных авторов варьирует от 7 до 50 %, причем в последние годы отмечается неуклонный рост данной патологии [9, 10, 11]. Установлено что 30-40 % больных эндометриозом страдают бесплодием и невынашиванием беременности. Не менее чем у 78 % больных, получивших медикаментозную терапию по поводу эндометриоза отмечается персистенция заболевания и его рецидивы. [2]
Не смотря на значительное увеличение числа научных и клинических исследований, посвященных различным аспектам эндометриоза, многие вопросы его этиопатогенеза, диагностики, течение и терапии остаются спорными.
В настоящее время считается доказанным, что выживание и имплантация жизнеспособных фрагментов эндометрия в перитонеальной поверхности обусловлены нарушениям локального иммунного ответа.
У женщин страдающих эндометриозом увеличено содержание перитонеалных макрофагов, усилена их активность и секреция ими различных цитокинов. В последние годы было доказано что в организме женщин больных эндометриозом повышается содержание провоспалительного цитокина интерлейкина - 8 [4, 5, 6,].
Выявлено что за продукцию ИЛ-8 отвечает 13q-21q регион 4-й хромосомы. Генетический полиморфизм ТА в - 251 участке повышает продукцию ИЛ-8 [7, 8].
В Азербайджанской популяции изучению генетической зависимости эндометриоза способствует этническая однородность популяции, высокая частота данного заболевания среди женщин репродуктивного возраста, в связи с чем значительный научный интерес представляют исследования по изучению полиморфизма гена отвечающего за экспрессию интерлейкина - 8.
Целю нашего исследования разработать методы прогнозирования и ранней диагностики эндометриоза по данным полиморфизмов гена ИЛ-8 среди женщин Азербайджанской популяции.
Материалы и методы исследования
Под нашим наблюдением находилась 70 больных страдающих эндометриозом. Диагноз быль подтвержден после операционного вмешательство. Больные были в возрасте от 15 до 56 лет. Длительность заболевания колебалось от нескольких месяцев до 6 лет.
Наряду с общеклиническим обследованием больным было проведено комплексное инструментальное исследование с использованием гистероскопии, гистеросальпингографии, эхографии. Также у всех больных было проведено генетическая тестирование на определения полиморфизма ИЛ-8-251 - АТ.
Контрольную группу составили 50 практически здоровых женщин.
Для выявления полиморфизма ИЛ-8-251-ТА было использовано метод PCR-ARMS.
Участок для амплификации быль выбран на основании материалов предоставленных NCBİ SNP под номером rs4073:
F1, 5′ - GTTATCTAGAAATAAAAAAGCATACAA - 3′;
R1, 5′ - CTCATCTTTTCATTATGTCAGAG - 3′;
F2, 5′ - CATGATAGCATCTGTAATTAACTG - 3′;
R2, 5′ - CACAATTTGGTGAATTATCAA - 3′.
Для проведения реакции были использованы следующие реагенты:
DNT-5μl; Buffer 2,5μ; MgCl2-1,75μl; dNTP-0,5μl, из каждого примера 10 pmol; Taq A - 0,2μl.
Реакция PCR было проведено по следующему протоколу:
94 ºC - 5 мин - 1 цикл, 94 ºC - 30 мин, 54 ºC - 30 с, 72 ºC - 30 с, 35 цикл и 72 ºC - 7 мин - 1 цикл.
Полученные материалы были визуализированы после электрофореза в 2 % - ном агорозном геле.
Результаты исследования
Генотипы по полиморфизму ИЛ-8 ТА представлен в табл. 1.
У женщин с эндометриозом генотип ТТ составила 41,4 %. В контрольной группе генотип АА составило 50 % в то время как этот генотип в основной группе составило 21,4 %.
Таблица 1
Распостраненность генотипов ИЛ-8 ТА среди практически здоровых женщин
и больных эндометриозом
|
Генотипы |
Контроль (n = 50) |
Эндометриоз (n = 70) |
|
TT |
7 (14 %) |
29 (41,4 %) |
|
TA |
18 (36 %) |
26 (37,2 %) |
|
AA |
25 (50 %) |
15 (21,4 %) |
Популяция было в пределах равновесия по закону Харди - Вайнберга. p > 0,05
Также эти группы отличались друг от друга по аллелным показателям.
Так как, у женщин страдающих эндометриозом частота алела Т составило 60 %. Этот показатель был выше, чем в контрольной группе. В контрольной группе частота аллела А составило 68 % в то время как частота алела Т было всего 32 %.
Нами было выявлено связь между генотипом Т/Т и эндометриозом. Частота генотипа Т/Т у женщин страдающих эндометриозом было в два раза выше чем в контрольной группе.
Генетическое тестирования женщин повышенного риска развитие эндометриоза представляет важный как теоретический, так и практический интерес. Выявления полиморфизма гена ИЛ-8 позволит на доклиническом этапе определить возможный риск развитие эндометриоза и заблаговременно начать индивидуальную профилактику этого заболевания.
Таблица 2
Частота аллелов по полиморфизму ИЛ-8 - 251 АТ среди женщин
с эндометриозом и в контрольной группе
|
Аллели |
Контроль (n = 100) |
Эндометриоз (n = 140) |
|
T |
32 (32 %) |
84 (60 %) |
|
A |
68 (68 %) |
56 (40 %) |
Список литературы
- Кулаков В.И., Андреева Е.Н. Эндометриозы. - М.: Медицина, 2006. - 410 с.
- Поморцев А.В., Гудков В.Г., Дегтярев А.М. Гормональный профиль больных наружным генитальным эндометриозом в различные фазы менструального цикла // Акуш. и гин. - 2002. - №1 - С. 35-42.
- Сидорова И.С., Коган К.А. Новый взгляд на природу эндометриоза // Акуш. и гин. - 2002. - № 3. - С. 32-37.
- Halme J., Becker S., Haskill S. Altered maturation and functional of peritoneal macrophages: possible role in pathogenesis of endometriosis // J. Obstet.Gynecol. - 1987. - P. 783-789.
- Hill J. A. et al. Effects of soluble products of activated macrophages on human sperm motion parameters // J. Fertil. Steril. - 1987. - №47. - P. 460-465.
- Halme J. Release of tumor necrosis fector by human peritoneal macrophages in vivo and in vitro // J. Obst. And Gynecol. - 1989. -№161. - P. 1718-1725.
- Hull J. Thomson A, Kviatkovski D. Assocation of respiratory syncytial virus bronchiolitis with the interleukin 8 gene region in UK families // J. Thorax. - 2000. - v. 55. - P. 1023-1027.
- Junko Fujihara, kuninori Shiwaku, Toshihiro Yasuda et all. Variation of interleukin -8 - 251 AT polymorphism in worldwide populations and intra-ethnic differences in Japanese populations. // Clinica Chimica Acta 337. - 2007. - P. 79-82.
- Karen Kinkel, Kathrin A. Frei. Diagnosis of endometriosis with imaging: a review. Eur. Radiol. - 2006. internet.
- Schindler A.E. Pathophysiology, diaqnosis and treatment of endometriosis // Minevra Ginecol. - P. 419-435.
- Vigano P, Parazzini F, Somigliana E. // Endometriosis: epidemiology and aetiological factors // J. Obstet. And Gynaecol. - 2004. - №18. - P. 177-200.