Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,778

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНА У ДЕТЕЙ С ПЕРИТОНИТОМ

Тусупкалиев А.Б. 1 Баубеков Ж.Т. 1
1 Западно-Казахстанский государственный медицинский университет имени Марата Оспанова
В основу работы положен анализ наблюдений за 70 пациентами с аппендикулярным перитонитом, находившимися на лечении в клинике детской хирургии ЗКГМУ имени Марата Оспанова в возрасте от 2 до 14 лет. В зависимости от распространенности диффузный перитонит выявлен у 32 детей, и у 48 пациентов диагностирован разлитой перитонит. Все дети были оперированы лапароскопическим методом. Основную группу (группа № 1) составили 38 больных, которым после окончательной санации брюшной полости в забрюшинное пространство правой подвздошной области одномоментно вводился препарат Ронколейкин (до 7 лет – 0,25 мг, старше – 0,5 мг), и в послеоперационном периоде одним из компонентов комплексной терапии являлась регионарная лимфотропная антибактериальная терапия (гентамицин 4–7 мг/кг). В качестве группы сравнения (группа № 2) наблюдалось 42 ребенка, которым в послеоперационном периоде применялась общепринятая антибактериальная терапия. Проведенные исследования показали, что после окончательной санации брюшной полости одномоментное введение в забрюшинное пространство правой подвздошной области Ронколейкина способствует нормализации интерлейкинового статуса к 14 суткам после операции. Примененная методика комплексной оценки иммунного статуса позволила выделить в качестве прогностически значимых показателей: ИРИ, уровень CD4+ и CD8+, уровень секреции ИЛ-1 и ИЛ-2, а также экспрессии ИЛ-1 р и ИЛ-2р.
Ронколейкин
перитонит
лапароскопия
1. Бондарь Б.Н., Пастернак И.И., Безруков Л.А. и др.//Иммунные нарушения и их коррекция тимостимулином при распространенных формах перитонита у детей // Детская хирургия. – 2000. – № 5. – С. 14–16.
2. Брискин Б.С., Савченко З.И. // Иммунологические аспекты прогнозирования эффективности антибиотикотерапии у больных с перитонитом // Вестник хирургии. – 2000. – № 1. – С. 21–24.
3. Виталиев М.Х.// Иммунокоррекция в комплексном лечении больных абдоминальным сепсисом // Астана медициналык. журналы. – 2006. – № 4. – С. 130–133.
4. Засорин Б.В.// Иммунная система в условиях экологического неблагополучия // Актуальные проблемы аллергологии и иммунологии. Алматы. – 2005. – С. 208–210.
5. Засорин Б.В.// Способ оценки токсического действия химических веществ. А.С. № 5614 от 24.02.1994 РК.
6. Рустемова К.Р.// Оптимизация алгоритмов лечения больных разлитым перитонитом // Медицина. – 2006. – № 11. – С. 29–32.
7. Тусупкалиев А.Б.// Перитониты у детей. – Актобе, 2007. – 144 с.
8. Cardinale F., Chinellato I., Caimmi S., Peroni D.G., Franceschini F., Miraglia Del Giudice M., Bernardini R. Perioperative period: immunological modifications. Int J Immunopathol Pharmacol. 2011 Jul-Sep;24(3 Suppl):S3-12. Review.
9. Kinoshita M., Miyazaki H., Ono S., Seki S.J. Immunoenhancing therapy with interleukin-18 against bacterial infection in immunocompromised hosts after severe surgical stress. Leukoc Biol. 2013 May;93(5):689-98. doi: 10.1189/jlb.1012502. Epub 2013 Feb 13. Review.
10. Osuchowski M.F., Craciun F., Weixelbaumer K.M., Duffy E.R., Remick D.G. Sepsis chronically in MARS: systemic cytokine responses are always mixed regardless of the outcome, magnitude, or phase of sepsis. J Immunol. 2012 Nov 1;189(9):4648-56. doi: 10.4049/jimmunol.1201806. Epub 2012 Sep 24.
11. Prakash P.S., Caldwell C.C., Lentsch A.B., Pritts T.A., Robinson B.R. Human microparticles generated during sepsis in patients with critical illness are neutrophil-derived and modulate the immune response.J Trauma Acute Care Surg. 2012 Aug;73(2):401-6; discussion 406-7. doi: 10.1097/TA.0b013e31825a776d.
12. Xia X.J., Liu B.C., Su J.S., Pei H., Chen H., Li L., Liu Y.F. Preoperative CD4 count or CD4/CD8 ratio as a useful indicator for postoperative sepsis in HIV-infected patients undergoing abdominal operations.J Surg Res. 2012 May 1;174(1):e25-30. doi: 10.1016/j.jss.2011.10.006. Epub 2011 Oct 25.

Актуальность. Перитонит характеризуется как хирургический стресс с многофакторностью воздействия, когда к эндогенным стрессорным факторам (инфекция, воспаление) присоединяются экзогенные факторы (наркоз, операционная травма) с выбросом в кровь стресс-гормонов, оказывающих мощное депрессивное воздействие на иммунитет [1, 2, 3]. Данное обстоятельство способствует формированию вторичного иммунодефицита, усугубляющего течение заболевания. В связи с этим комплекс проводимой послеоперационной терапии требует включения иммунокоррегирующих препаратов. Это, в свою очередь, требует применения адекватных иммунологических тестов, которые способны в наибольшей степени способствовать корректному прогнозу эффективности проводимого лечения и исхода заболевания [4, 5].

Цель исследования: иммунологическая оценка местного применения Ронколейкина при перитонитах различного генеза у детей.

Материалы и методы исследования

В основу работы положен анализ наблюдений за 70 пациентами с аппендикулярным перитонитом, находившимися на лечении в клинике детской хирургии ЗКГМУ имени Марата Оспанова в возрасте от 2 до 14 лет. В зависимости от распространенности диффузный перитонит выявлен у 32 детей, и у 48 пациентов диагностирован разлитой перитонит. Все дети были оперированы лапароскопическим методом.

Основную группу (группа № 1) составили 38 больных, которым после окончательной санации брюшной полости в забрюшинное пространство правой подвздошной области одномоментно вводился препарат Ронколейкин (до 7 лет – 0,25 мг, старше – 0,5 мг), и в послеоперационном периоде одним из компонентов комплексной терапии являлась регионарная лимфотропная антибактериальная терапия (гентамицин 4–7 мг/кг). В качестве группы сравнения (группа № 2) наблюдалось 42 ребенка, которым в послеоперационном периоде применялась общепринятая антибактериальная терапия.

Всем больным на 1-е, 3-е, 7-е и 14-е сутки проводили исследования по оценке иммунного статуса, которые включали определение количества CD3+, CD4+, CD8+, CD20+, с помощью моноклональных антител производства ООО «Сорбет» (Россия); оценку функциональной активности Т-лимфоцитов по проценту потребления глюкозы (ППГ) в реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ); расчет иммунорегуляторного индекса (ИРИ = CD4+/CD8+), определение уровней сывороточных иммуноглобулинов основных классов А, М, G, исследование фагоцитарной активности нейтрофилов с использованием тест-культуры стафилококка и определением фагоцитарного индекса (ФИ %) нейтрофилов, способных к фагоцитозу, и фагоцитарного числа (ФЧ) – числа микробов, поглощенных одним нейтрофилом [6].

Определение продукции ИЛ-1, ИЛ-2 и их рецепции проводили с использованием в качестве тест-системы лейкоцитарной взвеси периферической крови (ПК) человека, лишенной моноцитов. Сущность метода заключалась в:

1) разделении клеток ПК на клетки-продуценты ИЛ-1 и ИЛ-2 с помощью прилипания к стеклу;

2) получении супернатантов, содержащих ИЛ-1 и ИЛ-2;

3) оценке влияния супернатантов на РБТЛ с ФГА мононуклеарных клеток периферической крови, лишенных моноцитов [7].

Оценка секреции ИЛ-1 и ИЛ-2 проводилась в РБТЛ с ФГА на клетках донорской крови, обработанных супернатантами, содержащими ИЛ-1 и ИЛ-2, выделенными из мононуклеарных клеток больных. Оценка ИЛ-1р и ИЛ-2р осуществлялась аналогичным образом, только в данном случае в РБТЛ использовали клетки больного, обработанные донорскими супернатантами. Результаты оценивали по уровню ППГ. В качестве контроля иммунологических показателей использованы данные, полученные при иммунологическом исследовании 536 здоровых лиц соответствующего возраста. Результаты исследований обработаны методом вариационной статистики с использованием корреляционного анализа.

Результаты исследования и их обсуждение

Иммунный статус большинства больных с перитонитом из обеих групп характеризовался снижением ИРИ: до 2,0 + 0,1 (разлитой перитонит) и 2,8 ± 0,3 (диффузный перитонит). Данное обстоятельство было обусловлено снижением процента содержания CD4+ до 32,4 ± 5,8 % (разлитой перитонит) и до 39,9 ± 4,6 % (диффузный перитонит) при некотором увеличении популяции CD8+ – 26,5 ± 0,9 % (разлитой перитонит) и 24,4 ± 1,1 % (диффузный перитонит). Кроме того, выявлено снижение уровня всей популяции Т-лимфоцитов (CD3+) до 49,1 ± 5,0 % (разлитой перитонит) и 56,3 ± 2,9 % (диффузный перитонит). При этом отмечается снижение ППГ в РБТЛ до 12,6 ± 1,4 % (разлитой перитонит) и 15,0 ± 2,0 % (диффузный перитонит) в основном за счет CD4+. Также отмечено снижение функциональной активности В-лимфоцитов (CD20+), что проявлялось снижением уровня сывороточных иммуноглобулинов JgA (1,1+0,1 г/л и 1,4 ± 0,2 г/л соответственно) и JgG (8,2 ± 0,9 г/л и 9,8 ± 0,87 г/л) и фагоцитарной активности нейтрофилов: ФИ-44,1 ± 3,7 % и 50,6 ± 3,3 %; ФЧ-3,2 ± 0,11 и 4,7 ± 0,09 соответственно.

Нарушение активности Т-, В-звеньев иммунитета и процесса фагоцитоза было выражено в большей степени у пациентов с разлитым перитонитом, что обусловлено более высоким уровнем интоксикации и тяжестью заболевания.

При исследовании интерлейкинового статуса у детей с диффузным перитонитом была выявлена высокая секреция противовоспалительного ИЛ-1 (1,87 ± 0,02) и иммунорегуляторного ИЛ-2 (1,58 ± 0,02) с экспрессией рецепторов ИЛ-1р и ИЛ-2р (1,28 ± 0,15 и 1,35 ± 0,1), в то время как у пациентов с разлитым перитонитом формировался интерлейкинзависимый иммунодефицит со снижением секреции ИЛ-1 и ИЛ-2 (1,2 ± 0,08 и 1,0 ± 0,08) и экспрессии ИЛ-1р и ИЛ-2р (0,9 ± 0,07 и 0,8 ± 0,06). В группе здоровых детей данные показатели составляли: ИЛ-1 = 1,7 ± 0,02; ИЛ-2 = 1,4 ± 0,12; ИЛ-1р = 1,25 ± 0,1 и ИЛ-2р = 1,1+0,09.

Анализ динамики изученных параметров иммунитета в послеоперационном периоде показал, что на 1-е и 3-е сутки после операции не выявилось каких-либо тенденций или достоверных отличий по всем изученным показателям в обеих группах больных. На 7-е сутки, после проведения иммуномодулирующей терапии, в группе сравнения отмечено незначительное повышение содержания CD4+ и CD8+, но без нормализации их баланса. Уровни иммуноглобулинов и фагоцитарная активность нейтрофилов повышались незначительно. Продукция ИЛ-1, ИЛ-2 и экспрессия ИЛ-1р, ИЛ-2р практически не изменялись, в то время как в первой группе детей наблюдалось недостоверное увеличение содержания CD4+ и CD8+ с тенденцией нормализации их баланса. Отмечалось небольшое повышение уровня JgG и усиление фагоцитарной активности нейтрофилов. Продукция ИЛ-1, ИЛ-2 и экспрессия ИЛ-1р, ИЛ-2р повышались без достоверных отличий от исходных данных.

Изученные параметры иммунитета в исследуемых группах детей на 14-е сутки показали, что ИРИ в основной группе соответствовал показателям у здоровых лиц, в то время как в группе сравнения он был достоверно ниже (соответственно 2,3 ± 0,2 и 3,5 ± 0,3).

Кроме того, в основной группе больных констатирована нормализация субпопуляций CD4+ и CD8+, увеличение уровней иммуноглобулинов всех классов, усиление фагоцитарной активности нейтрофилов до нормальных показателей. В то же время в группе сравнения число CD4+ приближается к норме при сохраняющемся высоком уровне CD8+. В данной группе также отмечается увеличение уровней иммуноглобулинов и фагоцитарной активности нейтрофилов.

В отношении цитокинового статуса у больных с перитонитом установлено модулирующее действие одномоментного введения Ронколейкина с последующей регионарной лимфотропной антибактериальной терапией, т.е. снижение до уровня показателей здоровых детей секреции ИЛ-1, ИЛ-2 и экспрессии их рецепторов.

В группе больных, которым не проводилось введение Ронколейкина, установлено только недостоверное снижение секреции ИЛ-1 и особенно ИЛ-2, а также экспрессии ИЛ-1 р, ИЛ-2р.

Выводы

Проведенные исследования показали, что после окончательной санации брюшной полости одномоментное введение в забрюшинное пространство правой подвздошной области Ронколейкина способствует нормализации интерлейкинового статуса к 14 суткам после операции. Примененная методика комплексной оценки иммунного статуса позволила выделить в качестве прогностически значимых показателей: ИРИ, уровень CD4+ и CD8+, уровень секреции ИЛ-1 и ИЛ-2, а также экспрессии ИЛ-1 р и ИЛ-2р.


Библиографическая ссылка

Тусупкалиев А.Б., Баубеков Ж.Т. ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНА У ДЕТЕЙ С ПЕРИТОНИТОМ // Успехи современного естествознания. – 2015. – № 9-1. – С. 92-94;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=35534 (дата обращения: 13.08.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074